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导语:在学习周计划的撰写旅程中,学习并吸收他人佳作的精髓是一条宝贵的路径,好期刊汇集了九篇优秀范文,愿这些内容能够启发您的创作灵感,引领您探索更多的创作可能。
第一步:知道初中化学知识与高一化学知识的联系是基础。
第二步:建立高一化学知识体系是重点。
第三步:掌握科学的正确的学习方法是关键。
一、抓住化学基本概念与原理,明晰知识节点、建构知识网络
化学概念与原理都是抽象概括的知识,是比较难理解和不易掌握的,更是化学知识的重要组成部分,在化学体系中它们充当着知识网络中的“节点”。这部分知识的学习方法是理解概念的核心内涵,理清概念间的相互联系,透析基本原理的实质。
二、以化学基本概念和原理作为指导,重视实验,掌握元素化合物的知识
1.将各章内、各章间知识点横向比较、纵向联系,联线结网。高一化学按教材顺序,以第五章为界,碱金属、卤素的学习是将元素性质的理解向原子结构、元素性质递变规律的方向归纳;而氧族、碳族的学习,是用元素周期表的理论知识指导各主族具体的元素性质学习。掌握“结构葑位置葑性质”的关系是重点。
2.要以元素性质为核心,掌握“相似性”、“递变性”的同时注意“特殊性”,再跟物质的用途、存在、制法密切联系。
3.重视教师演示和学生分组实验的实验原理、设计、操作,重视实验习题探讨与处理。加强定量实验的误差分析。
4.元素化合物学习要尽可能紧密地联系社会、联系实际。
一.化学符号及其周围数字的意义分别是指元素符号、化学式和离子符号等及其周围的四种数字所表示的含义.具体内容如下:
1、元素符号宏观上表示元素,微观上表示该元素的一个原子.另外,还有一种特殊情况;那就是,部分元素符号还能表示由它所组成的物质等;
2、化学式宏观上表示物质及其组成,微观上表示该物质的构成.如果构成该物质的粒子是原子,那么它还能表示元素和一个该原子;如果构成该物质的粒子是分子,它除了表示一个该分子外,还表示该分子的构成;
3、离子符号整体上表示一个该离子,右上角表示一个该离子带几个单位的正或负电荷.
4、四种数字的含义是这样的:(1)化学符号前面的数字,表示微粒的个数.(2)化学符号右下角的数字,表示一个该微粒中所含该原子的数目.(3)化学符号右上角的数字,表示一个该离子所带的电荷数.(4)化学符号正上方的数字,表示在该化合物里该元素或原子团所显的化合价.
1.下列化学用语所表达的意义正确的是(
)
A.2K﹣﹣2个钾元素
B.Al3+﹣﹣1个铝离子
C.O3﹣﹣3个氧原子
D.2N﹣﹣2个氮分子
2.下列化学用语书写正确的是(
)
A.氦气:He2
B.两个金原子:2AU
C.铝离子:Cl﹣
D.硫酸铁:Fe2(SO4)3
3.下列化学用语书写正确的是(
)
A.两个氮原子:2N2
B.两个氢分子:2H
C.氧化铝的化学式:Al2O3
D.一个钙离子:Ca﹣2
4.下列化学用语正确的是(
)
A.二个氮分子﹣﹣﹣﹣2N
B.氦气﹣﹣﹣﹣He2
C.二硫化碳﹣﹣﹣CS2
D.锌离子﹣﹣﹣Zn+2
5.对下列化学用语中数字“2”的说法正确的是(
)
①2N
②2NH3③2OH﹣④SO2⑤H2O
⑥Mg2+
A.表示离子个数的是⑥
B.表示离子所带电荷数的是③
C.表示分子中原子个数的是④⑤
D.表示分子个数的是①②
6.下列各组选项中数字“2”的含义相同的一组是(
)
A.O2和2O
B.Cl2和Cu2+
C.3O2和SO2
D.2H2SO4
7.下列化学符号中数字“2”表示的意义,正确的是(
)
A.SO2表示二氧化硫中含有2个氧原子
B.2CO﹣﹣两个一氧化碳分子
C.Ca+2﹣﹣一个钙离子带两个单位正电荷
D.2Fe:表示2个铁元素
8.对于下列几种化学符号,有关说法正确的是(
)
①Fe②③N④OH﹣⑤CaCO3⑥H2O2
A.表示物质组成的化学式有①③⑤⑧
B.④⑤⑥中都含氧元素,其中氧元素的化合价均为﹣2价
C.表示阴离子的有②④,且它们都带有一个单位的负电荷
D.①③符号有三层意义:表示一种单质、一种元素和一个原子
9.下列各种符号所表示的意义最多的是(
)
A.H
B.2N
C.Na
D.2O2
10.下列化学用语的使用及其表示的意义,正确的是(
)
A.Ca+2:1个钙离子带2个单位正电荷
B.2K:2个钾元素
C.4SO3:4个三氧化硫分子
D.N2:1个氮原子
11.对下列化学用语中数字“2”的说法正确的是(
)
①2N
②2NH3③2OH﹣④SO2⑤H2O
⑥Mg2+
A.表示离子个数的是⑥
B.表示离子所带电荷数的是③
C.表示分子中原子个数的是④⑤
D.表示分子个数的是①②
12.对下列化学用语中数字“2”含义的说法正确的是(
)
①2CO②2NH3③2N④SO42﹣⑤⑥2H+⑦SO2
A.表示分子个数的是①②
B.表示离子所带电荷数的是④⑤
C.表示离子个数的是④⑥
D.表示分子中原子个数的是③⑦
13.下列化学用语书写错误的是(
)
A.氮元素﹣﹣﹣﹣﹣N
B.氧化铁﹣﹣﹣﹣﹣Fe2O3
C.氢分子﹣﹣﹣﹣﹣H2
D.硫离子﹣﹣﹣﹣﹣S﹣2
14.化学用语是化学学习的重要组成部分,下列对化学用语的说明中,不正确的是(
)
A.2SO42﹣:表示两个硫酸根离子带两个单位的负电荷
B.Na:表示钠元素,表示钠这种金属,表示一个
Na
原子
C.2H:表示
2
个氢原子
D.He:表示氦元素,表示氦气这种气体,表示一个氦原子
15.下列化学符号中数字“2”表示的意义正确的是(
)
A.2H:两个氢元素
B.CO2:一个二氧化碳分子中含有两个氧原子
C.S2﹣:硫元素的化合价为负二价
D.:一个镁离子带有两个单位正电荷
16.下列化学符号中数字“2”表示的意义正确的是(
)
A.Zn2+:一个锌离子带2个单位正电荷
B.SO2:二氧化硫中含有两个氧原子
C.2H:2个氢元素
D.:氧化钙的化合价为+2价
17.下列有关化学用语表示正确的是(
)
A.钙离子:Ca+2
B.2个氧分子:2O
C.氯化亚铁中铁显+2价:Cl2
D.铝原子结构示意图:
18.下面关于“2”的含义的解释中,正确的是(
)
A.Zn2+中的“2+”表示锌元素显正2价
B.2NO中的“2”表示2个一氧化氮分子
C.2S中的“2”表示二个硫元素
D.Fe2+中的“2”表示每个铁离子带两个单位的正电荷
答案:
1-5
BDCCC
6-10
CBCCC
11-15
CADAB
关键词:计算机学科;形式化方法;知识体系;课程教学
一、引言
形式化方法是基于数学上的形式机制的计算机系统研究方法。客观地讲,有数学的应用,就有形式化方法。但是,从计算机学科角度来讲,一般认为形式化方法是始于20世纪60年代末的Floyd、Hoare和Manna等在计算机程序正确性证明方面的研究。当时由于“软件危机”,人们试图用数学方法证明计算机程序的正确性而发展出各种程序验证方法,但是受程序规模的限制,这些方法并未达到预期的应用效果。从20世纪80年代末开始,在计算机硬件设计领域形式化方法工业应用取得的成果,掀起了形式化方法的学术研究和工业应用的热潮。学术界和工程界的研究人员开展了大量的工作,建立了许多较为成熟并进入应用的形式化方法相关理论、方法和技术。从广义来讲,形式化方法是计算机应用系统(软件、硬件、软件和硬件混合)设计、实现及维护的系统工程方法;狭义来讲,形式化方法是离散数学、数理逻辑、抽象代数等计算机学科基础理论和计算机应用系统开发的结合,是指导计算机应用系统的工程化开发的方法和技术。
计算机学科是一个年轻的工程学科,缺乏工程化的方法和技术一直是计算机应用系统研究的困难,也是困扰计算机学科教育的重要问题之一。例如,迄今为止,大量的计算机软件开发依然没有摆脱试凑和经验,从而,导致“软件危机”,以致于许多人们产生了“计算机是一门艺术,而不是一门科学”的错觉和误解。
从20世纪90年代开始,计算机学科中工程化方法和技术――即形式化方法――的教育引起了欧美计算机教育界的高度重视和关注。欧洲的英国、德国、法国、意大利、荷兰、西班牙等国家的高校相继为研究生开设了形式化方法方面的课程,并推广至本科生教育。在20世纪90年代中期,美国开展了形式化方法教育研究,并在美国顶尖的35所大学的计算机学科实施了研究生和本科生的教育实践。
IEEE-CS和ACM联合任务组于2004年5月提交了计算教程,软件工程分册CCSE(Computing Curriculum,Software Engineering)最终报告,在该报告给出的软件工程教育知识体系SEEK(Software EngineeringEducation Knowledge)中,“软件工程的形式化方法”(Formal Methods in Software Engineering)被列为一门核心课程(序列号为SE313)。CCSE最终报告的推出对计算机学科相关专业的形式化方法教育产生了重要的影响。
欧洲形式化方法协会于2001年成立了专门的形式化方法教育研究分会FME-SoE(Formal Methods EuropeAssociation-Subgroup on Education),目的在于研究并提出高等院校本科生形式化方法教育的知识体系及课程内容。该组织于2004年11月了对欧洲11个国家、58所高等院校中的117门形式化方法教育相关课程的调研报告。
本文旨在介绍欧洲高等院校在计算机学科形式化方法教育的现状,建立形式化方法教育的初步知识体系,探讨形式化方法教育实施的可能途径。
二、形式化方法知识体系
欧洲形式化方法协会教育研究分会对欧洲高等院校本科生的形式化方法教育进行了调查分析,将形式化方法分划为6个知识领域和15个知识单元。
形式化方法FM(Formal Method)知识体系中的6个知识领域,即:基础(Foundations),形式化规格(Formalspecification paradigms),正确性验证及演算(Correctness,verification and calculation),形式化语义(Formalsemantics),可执行规格支持(Support for executablespecification),其它(Other Topics)。
6个知识领域包括的15个知识子领域或者知识单元,这些知识单元包含的知识点如下:
FM01:形式化方法的集合理论/拓扑基础的知识点,包括离散数学(DMat,含ZF集合理论、函数、关系、图、树等)、格和不动点演算(FixP)、ScoR域理论(ScTD)等;
FM02:形式化方法的逻辑基础的知识点,包括一阶逻辑(FOL)、Hoare逻辑(HL)、λ演算(LamC)、时态逻辑(TL)、线性时态逻辑(LTL)、计算树逻辑(CTL)、行为(Actions)时态逻辑(TLA)等;
FM03:形式化方法的类型理论基础的知识点,包括类型理论和类型系统(TT)、多型(Polytypism)和泛型(PolyT,Geneficity)等;
FM04:形式化方法的代数基础的知识点,包括代数结构(AlS)、程序构造数学(MPC,含范畴论)等;
FM05:面向性质规格的知识点,包括抽象数据类型(ADT)、代数规格语言(CASL)等;
FM06:面向模型规格的知识点,包括抽象状态机器(ASM)、形式化程序技术(FPT,含前/后条件、不变量、证明、验证)、B方法(B)、VDM、VDM标准语言(VDML)、VDM++(VPP)、RAISE规格语言(RSL)、爱尔兰VDAM(IVDM)、z、面向对象z(Oz)、Alloy等:
FM07:多范式规格的知识点,包括集成概念(MPS,含多范式规格)等;
FM08:构造正确性的知识点,包括程序代数(AoP,含关系演算)等;
FM09:验证正确性的知识点,包括程序验证(Pv)、二叉决策图(BDD)等;
FMIO:机器检验正确性的知识点,包括模型检验(MC)、自动定理证明(ATP)、形式化方法测试(TFM)等;
FM11:求精技术的知识点,包括算法求精(含循环不变量)(ARef)、数据求精(DRef)、求精演算(RC)、B求精(RefB)等;
FM12:程序语言语义的知识点,包括行为(Actions)语义(AS)、代数语义(ASe)、指称和操作语义(FS)、抽象解释等(Absl);
FM13:形式化分布式、并发、移动的知识点,包括进程代数(PA)、通信系统演算(CCS)、通信顺序过程
(CSP)、π演算(PiC)、Petri网(Petri)、有限状态进程(FSP)、消息顺序图(MSC)、LOTOS、增强LOTOS(ELOT)、Estelle、Unity、系统描述语言(SDL)等;
FM14:声明式程序设计的知识点,包括函数式程序设计(FP)、Haskell、标准ML语言(SML)、扩展ML语言(EML)、CAML语言(CAML)、面向对象CAML(Ocaml)、Prolog等:
FM15:其它知识点,包括算法及复杂性(AL)、软件体系结构(SA)、Java建模语言(JML)、安全性分析技术(Safety)等。
三、总结
1.形式化方法的工业应用需求和教学过程实践的经验积累,已越来越体现出形式化方法教育的必要性和可行性。但是,国内计算机学科相关专业的形式化方法教育还相对薄弱,尚未在高等院校得到有效推广和实施。目前,国内形式化方法教育面临如下几个方面的困难:
(1)应用环境缺乏。软件工程是形式化方法的主要工业应用领域。国内软件企业近些年有很大的发展,但相当一部分企业仍然停留在个人英雄时代,很少需要团队合作或者是不需要大规模的合作。所以形式化方法在这里无法真正得到推广,结果一些大的企业也只有从国外引进人才或者引进人才后再进行培训。
(2)课程教材稀缺。目前国内仅有数种形式化方法相关教材,且基本上都是针对某种表示或方法,如z、B、Petri网等。涉及形式化方法的软件工程、硬件设计方面的教材/专著也不过两三种。这些极大地制约了教师对形式化方法的全面了解和把握。
(3)支撑工具匮乏。在形式化方法的教育中,为了提高学生学习的兴趣和课程教学的效果,形式化方法支撑工具是必不可少的,但我们却很难发现有价值的支撑工具。主要原因在于这些工具从认识到使用都需要花费很大的精力,当然开发相应的教学支撑工具也是需要花费较大的精力。
(4)实验环境缺少。形式化方法对于大规模应用系统开发尤为重要,教学单位一般只能提供小规模的教学实验环境,远远不及现实中的大规模系统。学生又缺乏到大型企业中实践和实习的机会,不能很好地使学生对形式化有一个感性的认识。
2.形式化方法教育得到欧美国家高等院校的重视和大力推广不过近十余年的时间,建立完善的知识体系和课程教学内容还需要进一步的努力。从欧洲58所高校的课程开设情况,结合CC2005以及计算学科的特点,可以看出形式化方法教育可能采取的途径为:专门语言/方法教学、综合内容课程教学、分散知识点教学。
(1)专门语言/方法教学: 仅仅围绕一些特殊或专门的形式化方法/语言进行教学,例如,Z语言、B方法、VDM语言、Petri网、逻辑及程序证明等。此方法可以对低年级学生实施教学,课程教学的目的在于培养学生能将形式化方法知识融会到其它后续课程的学习中,并逐步锻炼学生在计算机软、硬件系统的开发活动中使用形式化方法的能力。不足之处在于教学计划中仅仅包含了单一的方法/语言,学生不可能对形式化方法有广泛的认识和全面的了解。同时,由于商业软件所采用形式化方法的多样性,很难保证接受教育的学生达到学以致用,教学与实践的偏差难免太大。
关键词:黑山羊:血液:生理生化指标
中图分类号:S827 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2016)09-2301-03
黑山羊(Capra hircus)为偶蹄目(Artiodactyla)牛科(Bovidae)山羊属(Capra Linnaeus)动物。头大小适中、略显狭长、额平。雌、雄羊多数有角、有髯,鼻微直或凸起,被毛多为黑色,性情温顺:黑山羊具有体格强健、抗病力强、出肉率高、羊羔初生重、生长速度快等优点:水城地处云贵高原之上,属于喀斯特高寒山区。地形地貌复杂。土壤较为贫瘠。很多不能耕作的半山区可作为放牧的场所,黑山羊在自然环境下主要采食天然的牧草或树叶,所采食的草料不易受到污染。尤其是农药、化肥等对牧草的污染极小:黑山羊在饲养过程中也基本不使用抗生素。与其他肉类相比,食用黑山羊肉则有着更高的安全系数:其次肉的蛋白质含量高,脂肪、胆固醇则很少,因此黑山羊肉也是现代人追求健康饮食的选择。从医学角度看,山羊肉有助元阳、性温、补精血、益虚劳等功效。适宜高寒地区的居民食用:在贵州水城,就有水城羊肉粉这道民间美食,它起源于20世纪的80年代。其汤汁味美。肉质细嫩,备受食客青睐,而水城羊肉粉所选用的肉就来自当地所产的黑山羊。本试验对水城黑山羊血液的常规生理生化指标进行了测定。以期为其疾病预防及诊断、饲养管理、肉质营养研究、保种选育等提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 试验动物
试验用水城黑山羊于2015年3月在水城县双嘎乡某养殖场挑选,共10只(40kg左右),雌、雄比为4:6,均为健康成年羊。
1.2 试验方法
1.2.1 血液样品的采集 将10只健康黑山羊在空腹状态下颈静脉采血,分别用2mL血常规管(含EDTAK2)、5mL生化管(含硅石粉)收集血液,采血后立即送回实验室分析测定。
1.2.2 血液理化指标的测定 全自动血细胞分析仪(BC-3000)测定黑山羊血液生理指标,每份血样重复测定3次,取平均值。所测生理指标有:白细胞数目(WBC)、淋巴细胞数目(LYM)、中间细胞数目(MID)、粒细胞数目(GRAN)、淋巴细胞百分比(LYMR)、中间细胞百分比(MIDR)、粒细胞百分比(GRANR)、血红蛋白(HGB)、红细胞数目(RBC)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)、红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)。
全自动生化分析仪(日立7180)测定黑山羊血液生化指标,以3000r/min离心15min,吸取上清液分装后待测。所测生化指标有:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷草/谷丙(AST/ALT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、白球比(A/G)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、葡萄糖(GLU)、总胆固醇(CHOL)、肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)、钾(K+)、钠(Na+)、氯(Cl-)、钙(Ca2+)。
1.2.3 数据处理 试验数据用Excel统计软件进行统计,数据用平均数±标准差来表示。
2 结果与分析
2.1 生理指标测定结果
由表1可知,在测定的黑山羊14个血液生理指标中平均红细胞血红蛋白含量(MCH)在水城雌、雄黑山羊间差异极显著(P
2.2 生化指标测定结果
由表2可知,血液中的尿素氮(BUN)、钾(I
3 小结与讨论
3.1 贵州水城黑山羊生理指标测定结果分析
由表1可知,水城黑山羊雌羊的红细胞数目(RBC)、血红蛋白(HGB)分别为(5.03±1.26)×1012/L、(121.50±1.91)g/L,雄羊为(4.69±1.13)×1012/L、(125.83+18.06)g/L:张文丽等测定会理黑山羊血液的RBC、HGB分别为(14.14+2.79)×1012/L、(112.90+12.02)g/L;付志新等测定波尔山羊血液的RBC、HGB分别为(10.21±1.80)×1012/L、(73.56+10.38)g/L;赵中权等测定大足黑山羊血液的RBC、HGB分别为(12.49±0.83)×1012/L、(85.47±4.82)g/L。通过以上数据可以发现,水城黑山羊的红细胞数低于会理黑山羊、波尔山羊和大足黑山羊,血液的血红蛋白(HGB)含量均高于会理黑山羊、波尔山羊和大足黑山羊,其中水城黑山羊与波尔山羊之间差别最大。由于血红蛋白是一种运载氧的蛋白质,这说明水城黑山羊血液对氧的运载能力要强于以上几个山羊品种,并且平均单个红细胞的携氧效率可能会更高,这些特征可能是因为水城黑山羊长期生活在高原环境。
试验测定的水城黑山羊血液生理指标经统计分析发现:血红蛋白含量(MCH)在水城雌、雄黑山羊间差异极显著:红细胞压积(HCT)在雌雄羊间差异显著(P0.05),本次对水城黑山羊血液所测的生理指标可为以后的相关研究提供一定的参考。
3.2 贵州水城黑山羊生化指标结果分析
血浆中的尿素氮、血肌酐都是动物机体内新陈代谢的产物,其中尿素氮为蛋白质代谢的最终产物:血肌酐主要由黑山羊的肌肉组织代谢所产生,外源性肌酐则是食肉动物类通过摄食肉类在体内代谢的产物,水城黑山羊雄羊血液中的尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)均高于雌羊,这反映出成年雄性黑山羊在机体代谢方面可能要强于雌性黑山羊。
动物血液中的血钾、血钙、总蛋白等易受饲料配比的影响。水城雌、雄黑山羊的血钾含量分别为(5.01±0.17)、(5.87±0.57)mmol/L,血钾指标在雌、雄间差异显著(P
谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)主要分布在肝细胞和心肌细胞中,均是机体内较为重要的转氨酶,谷草转氨酶主要是催化谷氨酸与草酰乙酸之间的转氨作用,而谷丙转氨酶是催化谷氨酸与丙酮酸之间的转氨作用:碱性磷酸酶(ALP)也主要分布在肝脏中,是经肝脏向胆外排出的一种酶:血液中AST、ALT、ALP的含量与心肝的生理功能密切相关,此次所测数据可为以后水城黑山羊在肝脏功能和心血管疾病的检查和治疗中提供参考。
总蛋白主要是由白蛋白和球蛋白构成,其中球蛋白为一类免疫性蛋白,在机体免疫调节中发挥重要作用,其含量多少决定了免疫力的强弱。水城黑山羊血液的总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)分别为(78.49±5.63)、(20.41±1.62)、(59.72±7.45)g/L;循化县山羊血液的总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)分别为(70±9.37)、(45.22±6.03)、(24.82±5.99)g/L,辽宁绒山羊血液的总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)分别为(77.10±6.03)、(41.97±4.47)、(35.13±3.74)g/L。结果表明,水城黑山羊血液的总蛋白(TP)、球蛋白(GLOB)均要高于循化县山羊,其中总蛋白含量与辽宁绒山羊相当,而水城黑山羊血液中的球蛋白则是3个品种中最高的,由于球蛋白可作为机体免疫力强弱的一个评定指标,这反映出水城黑山羊的抗病力可能会强于其他山羊品种。
[关键词] 单核细胞;血小板;肝硬化
[中图分类号] R575.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2015)05(c)-0106-03
[Abstract] Objective To explore the changes and clinical significance of parameters of peripheral blood platelets and parameters of monocytes for patients with liver cirrhosis. Methods 50 patients with liver cirrhosis in our hospital from October 2013 to October 2014 were selected as the observation group.The level of PLT,P-LCR,MPV,PDW,PCT,percentage of monocytes and total number of monocytes in the observation group were tested via fully automatic hematology analyzer,and which was compared with that in the control group of 52 subjects with normal results of clinical physical examination. Results The level of PCT and PLT in the observation group was lower than that in the control group,with significant difference(P
[Key words] Monocytes;Blood platelets;Liver cirrhosis
肝硬化是一种或多种致病因素长期或反复损害肝脏所致的肝细胞纤维化性疾病。肝脏是凝血因子合成的主要场所,对于机体的止、凝血功能起着重要作用,当肝硬化发生后,肝细胞大量受损,导致纤溶功能和凝血异常[1-3]。本研究选取本院的肝硬化患者作为研究对象,采用全自动血液分析仪对其血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板体积分布宽度(PDW)、大血小板比率(P-LCR)、单核细胞百分比、单核细胞总数等进行检测,并与临床体检正常的对照组进行比较,旨在探讨肝硬化患者外周血血小板参数和单核细胞参数的变化及临床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取本院2013年10月~2014年10月收治的50例肝硬化患者作为观察组,其中女12例,男38例;年龄30~75岁,平均(44.73±5.56)岁;根据Child-Pugh分级标准分为肝功能A级组(26例)、B级组(16例)、C级组(8例)。同时选取52名临床体检正常且肝功能、血常规检查无任何异常的健康者作为对照组,其中女14例,男38例;年龄31~76岁,平均(45.33±4.86)岁。两组的性别、年龄等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
使用专用抗凝管采集所有受试者的静脉血2 ml,所有血液标本采用XN-1000全自动血液分析仪的体积(V)、激光散射(S)、高频传导(C)技术及其配套试剂检测PLT、MPV、PCT、PDW、P-LCR、单核细胞百分比、单核细胞总数等各参数值,所有标本2 h内检测完毕。
1.3 统计学处理
采用SPSS 16.0统计学软件对数据进行分析,计量资料以x±s表示,采用t检验,计数资料采用χ2检验,以P
2 结果
2.1 两组血小板参数的比较
观察组的PCT、PLT水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P
2.2 两组单核细胞参数的比较
两组的单核细胞百分比和单核细胞总数比较,差异无统计学意义(P>0.05)(表2)。
3 讨论
肝脏是机体的主要代谢器官,能够调节机体的抗凝血及血浆纤维蛋白原(FIB)溶解系统、凝血的相互作用与动态平衡,进而保持凝血系统的完整性[4]。肝硬化发生后期,患者会表现出凝血系统和免疫功能的损害[5-6],而PLT参与机体凝血,单核细胞则参与机体免疫功能。有效预测肝脏的损伤程度对疾病的诊断、控制治疗都有着非常重要的作用。
本研究采用全自动血液分析仪对肝硬化患者的外周血PLT参数和单核细胞参数进行检测,并与52名临床体检正常的对照组进行比较,结果显示,观察组的PCT、PLT水平显著低于正常健康者,差异有统计学意义(P
综上所述,肝硬化患者外周血单核细胞百分比和单核细胞总数变化不明显,但PLT参数较正常健康者出现异常变化。各参数的变化反映着肝损伤程度,掌握各参数变化情况对临床治疗有着重要作用。
[参考文献]
[1] 汪赛兵,唐四海.肝硬化患者凝血4项及血小板参数的临床研究[J].中国医药指南,2012,10(33):568-569.
[2] 郑兰,全静雯,李晓,等.肝硬化患者凝血4项指标与血小板参数检测的临床价值[J].生物技术通讯,2013,24(2):248-250.
[3] 程坤,但仁红,龙丽,等.血清胆碱酯酶与糖类抗原125水平检测在肝硬化诊断中的临床意义[J].中国当代医药,2014,21(22):94-95,98.
[4] 贾建平.肝硬化患者血清前白蛋白、凝血酶原时间、血小板测定的临床意义[J].实用心脑肺血管病杂,2010,18(9):1278-1279.
[5] 陈永琴,成宇,徐文丽.肝硬化患者血小板和单核细胞参数的变化及意义[J].检验医学,2012,27(11):954-956.
[6] 邹勇,淦勤.肝硬化合并胃底食管静脉曲张患者术后并发症的危险因素分析[J].中国当代医药,2013,20(36):159,161.
[7] 崔明淑.红细胞、血小板测定与肝硬化的临床意义[J].中国实用医药,2010,5(34):81-82.
[8] 王征,张世斌.肝炎肝硬化患者血小板急剧下降病因分析[J].胃肠病学和肝病学杂志,2011,20(8):725-726.
[9] 郝华,陈亚华.肝硬化患者血清前白蛋白、凝血酶原时间、血小板测定的临床意义[J].实用心脑肺血管病杂志,2010,18(9):1278-1279.
[10] 蒋孝华,谢玉桃,谭德明.病毒性肝炎患者的血小板减少机制探讨(附74例骨髓象分析)[J].中国现代医学杂志,2004,14(11):106-108.
[11] Eissa LA,Gad LS,Rabie AM,et al.Thrombopoietin level in patients with chronic liver diseases[J].Ann Hepatol,2008, 7(3):235-244.
[12] 林静华,焦晓阳,蔡应木,等.肝硬化患者血小板参数的变化及意义[J].中国校医,2008,22(6):691-693.
[13] Blonski W,Siropaides T,Reddy KR.Coagulopathy in liver disease[J].Curr Treat Options Gastroenterol,2007,10(6):464-473.
【摘要】 目的 探讨肝硬化患者外周血单个核细胞(PBMC)表面CD14、TOLL样受体(TLR2、TLR4)的表达情况及其与内毒素血症的关系。方法 分别采用显色基质鲎试剂试管法和流式细胞术检测50例肝硬化患者和30例健康志愿者外周血内毒素浓度及PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达。结果 肝硬化患者外周血内毒素浓度及PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达高于正常对照组(P
【关键词】 肝硬化;内毒素血症;Toll 样受体
内毒素血症是肝硬化患者发生严重并发症,甚至致死的重要原因之一,至今其预防和治疗效果不甚理想。内毒素的致病机制主要是依赖内毒素相关受体介导的,Toll受体2(TLR2)、Toll受体4(TLR4) 、CDl4是现已发现的内毒素相关受体[1]。本研究通过检测肝硬化患者外周血血浆内毒素浓度及单个核细胞表面CD14、TLR2、TLR4的表达,进一步明确TLR的表达与内毒素血症的关系。
1 材料与方法
1.1 研究对象
宁夏医科大学附属医院2008年12月1日-2009年3月1日收住院的乙肝肝硬化患者50例,其中男37例,女13例,年龄25-75 岁,平均(50.62±14.16)岁。所有乙肝肝硬化患者病例均符合2000年西安会议《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准[12]。肝功能分级采用Child-Pugh分级法,其中Child-Pugh A级28例,B级16例,C级 6例。并将患者根据有无腹水分两组,其中肝硬化合并腹水者27例,无腹水者23例。
同期随机选择30例健康人作为正常对照,其中男21例,女9例,年龄23~80 岁,平均(52.26±14.46)岁。
1.2 标本来源
80例研究对象清晨空腹采集外周血3mL。其中2mL外周血注入抗凝管中,流式细胞技术检测备用;1mL外周血注入加有1mL血液抗凝剂的无热原试管中,制成二倍稀释液。离心取上清液待检内毒素浓度。
1.3 检测方法
采用显色基质鲎试剂试管法检测内毒素浓度(东方鲎鲎试剂由厦门市鲎试剂实验厂有限公司生产);采用流式细胞术检测PBMC表面TLR2、TLR4、CD14的表达(CD14抗体由美国BD公司生产,TLR2、TLR4检测试剂由美国eBioscience生产),检测结果用平均荧光强度的几何均数表示。
1.4 统计学方法
所有实验数据均由自动分析后获取,应用SPSS 11.5统计学软件建立数据库并分析。计量资料参数采用均数±标准差表示;两样本均数比较采用t检验;多个样本均数比较采用方差分析;两变量关联性采用Pearson相关性分析。
2 结果
2.1 外周血内毒素浓度检测结果
经统计学处理,肝硬化患者外周血内毒素浓度(0.043±0.023)EU·mL-1显著高于正常对照组(0.027±0.018)EU·mL-1(P
2.2 BMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达
经过统计学处理,肝硬化患者PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达显著高于正常对照组(P
2.3 外周血内毒素浓度与PBMC表面 CD14、TLR2、TLR4表达的相关性
通过Pearson相关性分析,肝硬化患者外周血内毒素浓度、PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达呈显著正相关性。内毒素浓度与CD14、TLR2、TLR4的表达呈正相关(r分别为0.369、0.461、0.521,P
3 讨论
肝硬化患者由于存在肠道细菌菌群紊乱、门体分流等因素容易导致内毒素血症产生,内毒素(Lipopolysaccaride,LPS)激活kupffer细胞等产生 TNF-α、IL-6等炎性因子,从而加重肝脏及其他相关脏器的损害[2]。内毒素血症与肝硬化患者的自发性腹膜炎、肝肾综合征、肝性脑病等并发症的产生有关。
本研究采用显色基质鲎试剂(试管法)检测肝硬化患者内毒素浓度,结果表明:与健康人比较,肝硬化患者内毒素水平升高,肝硬化合并腹水患者组内毒素浓度高于肝硬化无腹水患者组。说明肝硬化患者存在内毒素血症,并且内毒素与肝硬化发病及病情进展相关。肝硬化患者肠道通透性增加,肠道菌群产生的内毒素通过血循环进入肝脏及外周血,内毒素与内毒素结合蛋白(LBP)结合,通过内毒素信号转导,引起下游的炎症因子分泌,炎症因子可能会引起机体免疫系统的紊乱,导致肝纤维化的发生或肝硬化进一步加重。内毒素可通过肝星状细胞分泌细胞因子产生炎症反应,内毒素本身又可能直接加重肝脏组织的损伤。肝硬化腹水的形成与内毒素血症逐渐加重有关,进一步说明内毒素与肝硬化发病及疾病进展相关。
TLR2、 TLR4、 CD14等是在宿主抗病原微生物的免疫应答中起重要作用的内毒素相关受体分子,是内毒素诱导炎症反应的始动环节[3]。其中TLR2、TLR4 是内毒素信号向细胞内转导的“门户蛋白”。TLR2、TLR4 、CDl4大量表达于外周血单个核细胞表面。研究显示TLR的表达与肝硬化患者内毒素血症及炎性因子的产生相关[4-6]。
本实验采用流式细胞术检测PBMC 表面CD14、TLR2、TLR4的表达,发现乙肝肝硬化患者的表达明显高于正常人,并且腹水患者PBMC 表面CD14、TLR2、TLR4的表达高于无腹水患者,内毒素浓度与CD14、TLR2、TLR4的表达成正相关。本研究提示CD14、TLR2、TLR4 在肝硬化的发生发展中可能有重要作用,其原因可能是肝硬化患者内毒素水平升高,大量的内毒素进入血液,与单个核细胞接触,引起单个核细胞对内毒素的应激和敏感度增加,导致 TLR表达的升高,TLR识别内毒素,启动炎症信号的跨膜转导,激活转导途径,诱导细胞产生大量的炎性细胞因子,这些细胞因子在肝纤维化和肝硬化的发病中起着重要作用[7]。
本研究中,肝硬化患者随着PBMC 表面CD14的表达增加,TLR2 显著增加。随着CD14的表达增加,TLR4 也显著增加,进一步提示CD14、TLR2、TLR4能够介导多种重要病原体成分与细胞的反应,是引起机体炎症反应的关键分子[8-9]。
综上所述,内毒素及内毒素受体CD14、TLR2、TLR4协同作用介导机体炎症的反应过程,可能参与肝纤维化或导致肝硬化进一步加重。本研究为肝硬化的临床治疗提供新的思路和策略,从减少内毒素的角度,或阻断内毒素信号传导途径,减少促炎细胞因子的产生,将有可能改善或延缓疾病的进程。随着 Toll 样受体与肝硬化研究的进一步深入,针对 Toll 样受体靶向调节的药物将对肝硬化的临床治疗开辟新的方向[10]。
参考文献
1] Janssens S,Beyaert R.Role of Toll-like Receptors in Pathogen Recognition[J].Clinlcal Microbiology,2003,637-646.
[2] Wiest R,Garcia Tsao G.Bacterrical translocation BT in cirrhosis[J].Hepatology,2005,41(3):422-433.
[3] Akira S,Takeda K,Kaisho T.Toll-like receptors:critical proteins linking innate and acquired immunity[J].Nat Immunol,2001(2):675-680.
[4] Manigold T,Bocker U,Hanck C,et al.Differential expression of toll-like receptors 2 and 4 in patients with liver cirrhosis[J].Eur J Gastroenterol Hepatol,2003,15(3):275-282.
[5] Riordan SM,Skinner N,Nagree A,et al.Peripheral blood mononuclear cell expression of toll-like receptors and relation to cytokine levels in cirrhosis[J].Hepatology,2003,37(5):1154-1164.
[6] Eriksson AS,Gretzer C,Wallerstedt S.Elevation of cytokines in peritoneal fluid and blood in patients with liver cirrhosis[J].Hepatogastroenterology,2004,51(56):505-509.
[7] Paik YH,Lee KS,Lee HJ,et al.Hepatic stellate cells primed with cytokines upregulate inflammation in response to peptidoglycan or lipoteichoic acid[J].Lab Invest,2006,86(7):676-686.
[8] 尉秀清,崇雨田,文卓夫.慢性乙肝和慢性重型乙肝患者血单核细胞Toll样受体2的变化[J].中山大学学报:医学科学版,2008,30(1):91-94.
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对于会做的题目。对会做的题目要解决对而不全的老大难问题,如果出现跳步往往就会造成丢分的情况,因此,答题过程一定规范,重要步骤不可遗漏,这就是分段得分。
对于不会做的题目,这里又分两种情况,一种是一大题分几小题的,一种是一大题只有一问的。对于前者,我们的策略是“跳步解答”,第一小题答不出来,就把第一小题作为已知条件,用来解答第二小题,只要答得对,第二小题照样得分。对于后者,我们的策略是“缺步解题”,能演算到什么程度就什么程度,不强求结论。这样可以比较大程度地得到分数。
题目本身是解题方法、技巧的信息源,特别是每卷必有的选择题中的题干中有许多解答该题的规定性。例如:选出完全正确的一项还是错误的一项,选一项还是两项等,这些一定要在读题时耐心地把它们读透,弄清要求,否则是在做无用功。
重视检查环节
【关键词】亚洲带绦虫;膜联蛋白b2;基因克隆;免疫反应性
abstract: objectiveto clone and express the gene named as annexins b2 of taenia saginata asitica so as to analyze the immunogenicity of its recombinant protein.methodsby online analysis of the gene at bioinfomatics websites to identify the gene from the taenia saginata asiatica full-length cdna plasmid library, the gene was cloned into prokaryotic expression vector pet-28a(+) and then transformed to e.coli bl21 with iptg induction. thereafter, the gene product was analyzed by sds-page and purified by ni-nta affinity chromatography. in addition, the immunoreactivity of the purified recombinant proteins was analyzed by western blotting.resultsas demonstrated by pcr, double enzyme digestion and dna sequencing indicated that the recombinant plasmid was successfully constructed and highly expressed. the recombinant protein tested with western blotting analysis could react with taenia asiatica and taeniarhynchus saginatus infected patient serum.conclusionthe annexins b2 of taenia saginata asitica has been cloned and expressed in the prokaryotic expression system and the purified protein has been confirmed with immunogenicity.
key words: taenia saginata asiatica; annexins b2; gene cloning; immunoreactivity
鉴于亚洲带绦虫与猪带绦虫及牛带绦虫在起源、分类学地位存在的差异[1-2],本课题组率先构建亚洲带绦虫成虫全长cdna质粒文库,并对该虫进行功能基因组的研究工作[3]。本文利用生物信息学工具从文库中筛选到了一个膜联蛋白b2(annexins b2)的同源基因,构建了原核表达载体,并对其原核表达产物进行免疫学方面的初步研究。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1血清、载体与菌株3种人体带绦虫患者血清取自粪检阳性的带绦虫患者。原核表达质粒pet-28a(+)及大肠埃希菌bl-21/de3由中山大学热带病防治教育部重点实验室惠赠。
1.1.2主要试剂和工具酶ex taq酶(含dntp),bamhⅰ,xhoⅰ,t4 dna连接酶 (大连宝生物工程公司);异丙硫代-β-d半乳糖苷(iptg)(美国promega公司);质粒纯化试剂盒(广州东盛科技公司);辣根过氧化物酶标记的山羊抗猪igg二抗、兔抗人二抗、3,3二氨基联苯胺(dab)显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);氯化钙、氯化钠等为国产分析纯试剂。
1.2方法
1.2.1annexins b2基因的识别及扩增将获得的亚洲带绦虫annexins b2基因进行blastx分析。并根据已获得的该基因全长编码序列的开放阅读框,利用软件设计引物(引物由上海联合基因公司合成),分别带上bamhⅰ和xhoⅰ的酶切位点进行pcr反应。
1.2.2重组原核表达质粒的构建及鉴定pcr产物和pet-28a(+)载体分别用bamhⅰ和xhoⅰ双酶切,回收、连接后转入大肠埃希菌bl-21/de3感受态细胞,对阳性克隆依次进行质粒的提取、双酶切和pcr鉴定,并进行重组质粒dna测序鉴定(测序由英俊科技股份有限公司完成)。
1.2.3重组蛋白的表达及纯化按照常规方法进行蛋白诱导表达,考马斯亮兰蛋白染色液染色观察蛋白表达情况。确定蛋白表达后,进行大量的诱导表达,并判断重组蛋白的可溶性,再将样品加入预先处理好的ni-ida his.bind树脂亲和层析纯化柱中,最后再用pbs 24h透析以去掉过柱时留下的咪唑。
1.2.4western blotting分析重组蛋白的免疫反应性用3种人体带绦虫患者及正常人血清与辣根过氧化物酶(hrp)标记的兔抗人igg进行western blotting鉴定。
2结果
2.1annexins b2基因的识别和序列分析该基因全长922bp,编码区为224~686bp。其最大orf为其完整编码区。
2.2原核重组质粒的鉴定将重组质粒进行pcr和双酶切鉴定,产物行0.8g/l琼脂糖凝胶电泳。结果显示在500bp左右有一清晰条带,与目的基因大小基本相符。此外,重组质粒的测序报告表明插入序列与理论序列一致,证明重组质粒构建成功(图1)。
2.2蛋白表达及纯化结果将构建好的重组质粒转化到e.coli bl/de3中,超声裂解后sds-page电泳分析结果显示在大约25ku处出现高效表达条带(图2),与目的蛋白基本相符。测得纯化产物的蛋白浓度为0.526g/l。
2.3western blotting鉴定纯化蛋白的免疫反应性
用感染亚洲带绦虫、猪带绦虫、感染牛带绦虫的患者血清以及亚洲带绦虫感染猪的血清与纯化蛋白反应的结果均显示出较清晰的条带,而阴性对照血清在相应位置未识别出该蛋白条带(图3),表明该表达产物具有良好的免疫反应性。图1重组质粒的pcr和双酶切鉴定
fig.1 the identification of the pet-28a(+)-ta annexins b2 by pcr amplification and digestion with restriction enzymesm1:dna标准(dl2000);1:pcr产物;2:pet-28a(+)质粒双酶切;3:pet-28a(+)-annexins b2重组质粒双酶切;m2:dna标准(dl 15000)。图2100g/l sds-page分析pet-28a(+)-ta annexins b2在大肠埃希菌中的表达产物及其纯化产物fig.2 100g/l sds-page analysis of the prokaryotic expression product and purified product
m:蛋白marker;1:pet-28a(+)iptg未诱导;2:pet-28a(+)iptg诱导;3:pet-28a(+)-annexins b2 iptg未诱导;4:pet-28a(+)-annexins b2 iptg诱导;5:pet-28a(+)-annexins b2上清;6:pet-28a(+)-annexins b2沉淀;7:pet-28a(+)-annexins b2纯化蛋白。
3讨论
带绦虫病的流行在我国西部一直是一个严重的公共卫生问题。每年由带绦虫病造成的健康和畜牧业经济损失上百亿,严重影响西部欠发达地区的社会发展。目前,亚洲带绦虫病的防治研究的重点集中在诊断和疫苗候选抗原、药物靶标、致病的分子机制研究。图3重组蛋白的western blotting 鉴定fig.3 western blotting analysis of the recombinantsm:蛋白marker;1:纯化蛋白与亚洲带绦虫患者血清的反应结果;2:纯化蛋白与牛带绦虫患者血清的反应结果;3:纯化蛋白与猪带患者血清的反应结果;4:纯化蛋白与亚洲带绦虫感染猪血清的反应结果;5:纯化蛋白与正常人血清的反应结果。
本实验通过生物信息学方法从已经构建好的亚洲带绦虫成虫cdna质粒文库中筛选出了一个膜联蛋白(annexins b2)的同源基因,并且预测出该基因位于胞浆,无跨膜区,二级结构基本上是以α螺旋为主。这些都符合膜联蛋白家族的共同特征[4]。根据膜联蛋白家族分布广泛,表达丰富且稳定的特性,可以推测其在绦虫的生理活动中可能起着重要的作用。
膜联蛋白是一个广泛存在的蛋白家族,在所有真核基因组中广泛表达。具有内部重复单位和“g-x-g-t-(38residues)-d/e”基序[5],即ca2+结合区域的特征,用以结合带有负电的脂质。虽然它为钙结合蛋白,但是在结构上却没有ef手,而且在和ca2+结合后,还可以与磷脂再次结合而发挥生物学效应。例如,细胞的胞吞胞吐,离子通道的形成,调节磷脂酶a2的活性及细胞内外ca2+浓度、抗炎症反应等。在长期的生物进化过程中,膜联蛋白家族各成员在生物学特性和生理功能方面表现出非常复杂的关系,且在研究过程中发现,annexins没有信号肽,没有跨膜结构,是一个典型的细胞内蛋白。但是,却有学者发现它可以与细胞外基质发生作用。例如,抗炎[6]、抗凝[7]、抑制肿瘤[8]等。最新的研究报道,当将其作为疫苗的候选因子时,可以消除一些寄生于哺乳动物体内的寄生虫。此外,学者们认为膜联蛋白是维持细胞膜表面结构和信号转导功能的重要蛋白。并可能具有激活纤维蛋白酶原的功能,有助于破坏宿主的结缔组织,使虫体抗原更加容易进入宿主机体,诱发免疫应答。因此,对该基因的研究有助于进一步了解它的生物学功能及开辟预防治疗寄生虫病的新途径[9-10]。
目前,annexins b2已经在猪囊尾蚴的研究被发现并命名,但是具体的生理功能还不清楚,且在亚洲带绦虫研究领域还是空白。因此,本研究将亚洲带绦虫成虫annexins克隆到原核表达质粒pet-28a(+)中,构建重组质粒,在大肠埃希菌bl-21/de3中用iptg诱导表达,表达产物通过sds-page电泳进行鉴定。sds-page结果表明,该蛋白在全菌和沉淀中都有表达,上清中有微量的表达,说明annexins主要表达在包涵体中。因此,进一步溶解包涵体[11],经变性处理并亲和层析纯化后,得到了大量较纯的重组蛋白。此外,还尝试性的用上清过柱纯化并用蔗糖进行蛋白浓缩,也得到部分有活性的蛋白。western blotting就是以抗体-抗原沉淀反应为基础的,可用于不同抗原的比较和定量。其检测结果表明所获得的重组蛋白与猪带绦虫、牛带绦虫及亚洲带绦虫有较强的交叉反应且在绦虫中的诊断特异性不高,推测其不能作为免疫诊断抗原的合适候选分子。但是,其具有免疫活性的高效表达。由此可推测它是一个具有开发潜力的基因。总之,本项研究填补了该蛋白在亚洲带绦虫研究领域的空白,也为进一步研究该基因的生物学功能及在诊断尤其是疫苗研究方面奠定了基础。
【参考文献】
\[1\]包怀恩. 我国亚洲带绦虫研究的现状和展望 \[j\]. 热带医学杂志, 2002, 2(3):215-219.
\[2\]张朝云,杨明,张科,等. 云贵州三地牛带绦虫核糖体trna-its1序列分析 \[j\].贵阳医学院学报, 2006, 31(4):291-295.
\[3\]黄江,胡旭初,包怀恩,等. 亚洲带绦虫成虫全长cdna质粒文库的构建及est测序 \[j\]. 热带医学杂志, 2007, 7(2):116-118.
\[4\]moss se, morgan ro. the annexins \[j\]. genome biol, 2004, 5:219-221.
\[5\]choi sh, kwon sr, lee eh, et al. molecular cloning, functional characterization and localization of an annexin from a fish gill fluke microcotyle sebastis (platyhelminthes: monogenea) \[j\]. mol & bioche parasitol, 2009,163(1):48-53.
\[6\]高奋堂,曹云山,徐义先,等. 氟伐他汀对人外周血单个核细胞膜联蛋白a1表达水平的影响 \[j\]. 临床心血管病杂志, 2006, 22(4):209-211.
\[7\]王义会,闫强,王平,等. 膜联蛋白b2基因的克隆及其真核表达载体的构建 \[j\]. 动物医学进展, 2007, 28(3):31-33.
\[8\]朱逢佳,曾苏,曹江. 膜联蛋白-1与肿瘤\[j\]. 细胞生物学杂志, 2008, 30(5):581-585.
\[9\]zhang y, wang kh, guo yj, et al. annexin b1 from taenia solium metacestodes is a newly characterized member of the annexin family \[j\]. biol chem, 2007, 388(6):601-610.
关键词 高血压 ISH 动脉粥样硬化 危险因素
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.08.008
我国老年高血压患者已超过8000万,数量占世界各国首位[1],单纯收缩期高血压(ISH)是老年高血压患者最常见、最重要的高血压亚型。2009年基层版高血压指南也首次将ISH患者单独列为一个高血压亚型,充分体现了ISH患者共有或独特的疾病特点,老年高血压患者由于血管弹性及顺应性下降,脉压差增大,多伴有动脉粥样硬化斑块。动脉粥样硬化(AS)是以血管中层内膜厚度(IMT)增厚、粥样斑块形成为主要表现的波及全身大、中型弹力型血管的系统性疾病。有报道称[2]MT增厚发生于斑块出现之前,IMT也常被作为全身AS的早期指标。流行病学调查表明,MT>1mm时,心、脑血管事件发生危险性明显增加,IMT每增加2mm,心肌梗死相对危险性增加33%,卒中相对危险性增加28%[3]。本研究对比分析了老年ISH及非ISH患者颈动脉粥样硬化的差异及其可能的危险因素。现总结报告如下。
资料与方法
一般资料:2009年12月~2011年3月收治老年高血压患者143例,其中ISH组(收缩压≥140mmHg和舒张压<90mmHg)79例;N-ISH组[收缩压≥140mmHg和(或)舒张压≥90mmHg]64例。血压测定采用符合计量标准的水银柱血压计测量右上臂血压,收缩压、舒张压读数分别取Korotkoff第Ⅰ音、第Ⅴ音为准。测量前休息15分钟,每次坐位测2次,取平均值。所有入选病例均排外肝、肾疾患,血液系统疾病,甲状腺疾病及肿瘤疾病;1个月内有外伤或手术史、脑卒中、高热、妊娠、急性感染、风湿病、重度残疾及精神障碍,传染性疾病等。
方法:颈动脉超声测定应用AT L2超9、LOGI Q2500彩色多普勒超声诊断仪,周围血管探头频率7.0MHz。检查前嘱咐患者休息5~15分,取平卧位,头偏向检查对侧,充分暴露颈部,沿胸锁乳突肌外缘纵切扫查,依次显示颈总动脉近端、中段和远端,至分叉处分别探测颈内动脉和颈外动脉。颈动脉内膜中层厚度,IMT正常值≤0.9mm,1.0~1.2mm为内膜中层增厚,≥1.2mm为粥样斑块形成[4]。本研究所采用的数据为左颈总动脉所测数据。
统计学处理:采用SPSS17.0统计软件进行分析,计量资料以X±S表示,计数资料以例数/百分比表示。组间计量资料比较采用两独立样本t检验,率的比较应用X2检验。随后将诸多对于AS有影响的可疑因素作为自变量,以是否存在AS为因变量,对老年高血压患者进行了AS危险因素的多因素Logistic回归分析,P<0.05为差异有统计学意义。
结果
两组一般资料比较:在对比分析之前对入组基本情况进行了比较,两组年龄、病程、性别、体重、血脂、血糖以及其他患病情况等一般资料比较,差异均无显著性(P>0.05),因此可认为两组动脉粥样硬化可疑危险因素的基线情况没有差异。结果见表1。
两组颈动脉内-中膜厚度及动脉粥样硬化的差异比较:对ISH和N-ISH两组颈动脉内-中膜厚度的差异进行比较,两组收缩压、舒张压、脉压差,以及内膜正常、内膜增厚和有粥样斑块的发生率均存在差异,具有统计学意义(P<0.05)。ISH患者内膜增厚和发生粥样硬化的发生率分别为43.9%和45.6%,明显高于N-ISH患者组35.5%和39.7%的发生率,提示对于老年高血压患者在年龄、性别和其他基本情况同等的基础上,ISH患者具有比N-ISH患者更大发生动脉粥样硬化的风险。结果见表2。
老年高血压患者颈动脉粥样硬化的危险因素分析:为进一步分析可能和老年高血压患者动脉粥样硬化相关的危险因素,将吸烟、年龄、体重指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、脉压差(BP)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(2hPG)、糖化血红蛋白HbA1c等可疑因素作为自变量,以动脉粥样硬化作为因变量进行Logistic多因素回归分析,发现吸烟、年龄、BMI、SBP、DBP、BP、LDL-C相应的OR值均>1,所以认为这7个因素是老年高血压患者发生动脉粥样硬化的危险因素。尤以SBP、BP、年龄、LDL-C的相关系数为最显著均>1.5,其OR值和95%CI分别为1.987(1.655~3.243)、1.769(1.223~3.001)、1.629(1.106~2.037)、1.504(0.149~12.267)。提示收缩压越高,脉压差及年龄越大,LDL-C越高,发生动脉粥样硬化的可能性越大。结果见表3。
讨论
高血压是一种以血管为主要病变的疾病,与动脉粥样硬化密切相关[5]。动脉粥样硬化早期可表现为血管壁内-中膜增厚,特征表现是动脉粥样斑块的形成[6],随着原发性高血压病程进展,临床上逐渐出现以靶器官受损和动脉硬化加速。颈动脉在动脉硬化发生发展过程中最早被累及,所以颈动脉MT通常被用作评价包括冠状动脉硬化在内的动脉粥样硬化的发展指标,被认为是动脉粥样硬化的早期表现[7]。Bots等[8]研究结果表明,收缩压与颈总动脉MT相关,收缩压每增加10mmHg,颈总动脉MT增加0.02mm。目前认为收缩压升高是MT增厚的危险因素。
老年人压力感受器敏感性减退、动脉弹性变差,使得收缩期血液流入时动脉压力急剧上升。更重要的是,僵硬的管壁立即物理性地将施加于管壁的血流压力反射回去,形成的血压波峰在收缩期即可出现,并与心脏性收缩期血压合并,导致收缩压严重异常升高[9]。另一方面,中心动脉舒张期压力由于失去了正常弹性动脉的舒张早期反射波的协同,衰减加速,舒张压亦异常下降。因此,老年人常见在收缩压升高的同时舒张压降低,脉压增宽,这种随着增龄舒张压的降低和收缩压的增加导致脉压增宽是造成老年ISH的主要原因[10]。因此,ISH患者具有一些独特的疾病特征,临床中要针对具体合并症情况,做到用药个体化诊疗[11]。
本研究对比分析老年单纯收缩期高血压患者和非单纯收缩期高血压患者颈动脉内-中膜厚度及动脉粥样硬化发生的差异,结果表明老年单纯收缩期高血压组颈动脉内膜增厚的发生率达45.6%,粥样斑块的发生率为43.9%,颈动脉硬化的总发生率为89.5%,而非单纯收缩压增高组颈动脉内膜增厚的发生率为39.7%,粥样斑块的发生率为35.5%,颈动脉硬化的总发生率为75.2%,两组比较差异有显著性(P<0.05),与文献报道一致。提示,ISH患者比非ISH患者发生颈动脉粥样硬化的风险更大。进一步对引起动脉粥样硬化的可疑危险因素和发生动脉粥样硬化之间的相关性进行了Logistic回归分析,结果显示吸烟、年龄、BMI、SBP、DBP、BP、LDL-C等7个因素是老年高血压患者发生动脉粥样硬化的危险因素,其中SBP、BP、年龄、LDL-C和发生动脉粥样硬化的相关性最大。结果与文献报道一致。
因此,对于老年ISH高血压患者应该充分关注其疾病特点,尤其需要关注收缩压、脉压差以及LDL-C的达标,以尽可能的降低发生动脉粥样硬化的风险。
参考文献
1 中国老年高血压治疗共识专家委员会.中国老年高血压治疗专家共识[J].中华老年心脑血管病杂志,2008,10(9):641-649.
2 Yamasaki Y,Kodama M,Ni shizawa H,et al.Carotid intima-media thickness in Japanese type 2 diabetic subject s:predictors of progression and relationship with incident coronary heart disease[J].Diabetes Care,2000,23(9):1310-1315.
3 Simon A,Gariepy J,Chironi G,et al.Intima-media thickness:a new tool for diagnosis and treatment of cardiovascular risk[J].J Hypertens,2002,20(2):159-169.
4 邹艳秋,戈晓华.颈部动脉超声多普勒实用手册[M].北京:学苑出版社,1996:6.
5 江凤,邓辉胜,李明星.老年高血压患者动态脉压与颈动脉重构的相关性[J].中国动脉硬化杂志,2003,11(7):649-651.
6 淡雪川,罗开良,李成玲.动脉硬度指数与高血压患者颈动脉内膜中膜厚度的关系[J].中国动脉硬化杂志,2006,14(10):903-904.
7 潘永瑜,吕菁,石晓欣.老年单纯收缩期高血压与颈动脉粥样硬化的关系[J].中国动脉硬化杂志,2009,17(8):689-691.
8 Bots ML,Witteman JC,Hofman A,et al.Low diastolic blood pressure and atherosclerosis in elderly subjects:the Rotterdam study[J].Am J Cardio,1995,75:455-458.
9 Vasari RS,Beiser A,Seshadri S,et al.Residual lifetime risk for developing hypertension in middle-aged woman and man[J].JAMA,2002,287(8):1003-1010.