时间：2023-04-17 17:11:29
导语：在微生物论文的撰写旅程中，学习并吸收他人佳作的精髓是一条宝贵的路径，好期刊汇集了九篇优秀范文，愿这些内容能够启发您的创作灵感，引领您探索更多的创作可能。
传统教学内容往往与企事业的实际需求有所偏差，为了让学生在今后的工作实践中能实际应用所学知识技能，我们首先对相关行业的企事业单位进行调研，并根据调研结果对教学内容进行了相关调整，将教学内容分为基础部分和专业部分。基础部分为必须讲授的微生物基础知识及实验技能训练，它们包括：微生物在自然界中的分布；微生物的分类、形态、构造及功能；微生物的营养和培养基；微生物代谢、控制和培养；显微技术、微生物大小测定及计数、无菌操作技术。专业部分为微生物在特定专业领域的应用知识及实验方法：由于我院教学对象为制药工程专业的学生，因此设定了微生物育种与保藏、微生物的扩大培养、发酵工艺优化等专业相关知识技能的训练。同样的，若对于环境工程专业的学生，应该讲授一些与环境相关的知识，比如环境因素对微生物的影响，微生物与环境修复以及微生物与环境检测等。对于食品工程专业的学生，则应该讲授的实验内容包括：食品中微生物的检测、食品在自然发酵和酸败过程中微生物的作用等内容。
二“、理论实验一体化”整合教学内容
微生物学是一门实验性和应用性很强的学科，微生物学实验是该门课程的重要组成部分，实验课的设置目的是使学生对微生物学的认识从理性上升为感性，在充分理解、掌握理论知识的基础上，提高学生们的操作技能。微生物学教学传统的教学模式是理论教学与实验教学分段进行，即理论讲授到一定的阶段后进入到实验教学中。这种教学模式优点是能突出理论知识的系统性和完整性，并对后续的实验教学起到较好的理论指导作用。但这种这种重理论系统完整性，而轻实践技能的培养模式，已不能更好地满足当今社会对高职院校人才的具有良好的实践能力的要求。我们将实验技术及相关理论知识按相关性原则进行了一体化整合，在满足实用、可接受深度原则的前提下，对一些对学生将来相关工作技能形成相关性不大的专业理论大胆舍弃，采取边实验边讲授对应理论知识的教学策略，具体安排见表1。整合后的教学实践利于同学们将理论知识与实践技能有机结合起来，使同学们既可以理解这些知识技能具体的应用，又会对理论知识有具象化的理解。微生物学是以实验为基础的科学，它的概念和规律是通过实验来形成的，微生物学实验是对课程理论的验证与升华，将实验教学与相应的理论内容结合，可以有效地提高微生物学教学效果。
三、以学生为主体，安排独立设计综合应用实验
传统的微生物教学内容安排彼此孤立，缺乏连贯性，造成学生的基本知识不扎实，基本技能训练少，基本技能掌握不牢固；再加上设计实验少，没有研究实验，学生的综合能力得不到有效的锻炼和培养，学生缺乏学习兴趣。因此在教学内容中加入了两个综合应用实验，要求学生分组独立设计完成，以达到学以致用的效果。每组学生自行查阅文献、进行独立设计、自行实验。在实验过程中，定期组织全班性的交流汇报，以便教师可以及时监督实验进度，对学生实验过程中出现的问题给出解决的建议；学生最后以论文的形式进行总结报告。学生不但通过设计完成工作任务融会贯通了相关的实验技术和理论知识，而且会提高实际工作能力。例如：学生在遇到问题时，需通过网络或图书馆查阅相关文献资料，学生的分析及自学能力得到提高。在实验计划实施过程中，不同学生可能面临并解决不同的问题，学生独立运用已有知识技能解决实际问题的能力增强、思维能力得以锻炼。实验中所需的材料的制作（例如无菌器材的准备、培养基的配置等）及实验操作均由学生自己完成，学生动手能力得到充分锻炼。实验以小组为单位完成，实验自始至终需要团队每名成员的参与，成员之间必须通力合作，确保实验顺利完成，培养了学生的团队工作意识。
需要指出的是，由于调动了学习兴趣和积极性，学生并没有因为需要课下花较多的精力来查找资料、设计实验、培养微生物，而产生怨言。学生不记名问卷调查结果也对这种改革后的教学方式表示欢迎。若要“以实际应用为导向、理论实验一体化教学、以学生为主体”的教学模式得以实施，需要系统性制订实验管理规范，全方位开放仪器设备与实验室时间，为实验教学提供制度保障。要求学生必须严格执行进出实验室登记、仪器设备使用登记、实验记录登记等规定，以便及时掌握实验室开放现状和仪器设备使用现状。同时，应该完善成绩评定制度。除传统的理论试卷考试和实验报告评定实验成绩外，将基础部分的操作技能考核、综合部分的实验设计及结果汇报表现均纳入最终的成绩评定。改变了以往学生死记硬背应付理论考试、抄袭结果应付实验考核的现状，促使学生能够认真练习，认真思考所学的知识技能。
实验室管理的大忌就是脏和乱，尤其是仪器、物品的放置杂乱无序，会给工作带来很大不便，影响工作质量，降低工作效率；电器和压力容器无序地乱放，会有安全隐患。更为重要的是，实验室的脏和乱，对学生会产生严重的负面影响，不仅会影响树立整洁、有序、勤奋、严谨的科学作风，甚至影响综合素质的培养。多年来，微生物学教学实验室，能够常年保持整洁、干净的良好状态，究其主要原因有二：一是管理者具有强烈的事业心和责任感。二是具有严格得力的管理措施：第一，每个学期的开始和结束，都要全面、彻底地进行室内卫生大清扫，包括门窗玻璃、桌面、台面、地面、仪器、器皿和物品等；第二，每次实验课结束后，留下4～8名同学进行清扫和归弄整理工作，做到桌面上的染料不留任何痕迹，用过的所有玻璃器皿全部洗刷干净沥干在筐里，所有物品摆放整齐，格局统一。这样一来，其每一次实验课都以干净、整洁的崭新面貌迎接教师与学生们。
2实验教学准备工作几项准则
2.1严格进行每个实验项目的预实验
预备实验是保证实验教学质量的前提，其目的是：检验实验技术方法及操作规程是否准确无误，所用溶液、试剂和药品是否合格；进一步确定实验所需时间，探索可能出现的问题并拟定解决问题的方案，根据实验难易程度确定评分标准等[6]。另外，制片及染色技术实验，特别是微生物的生长与培养实验，常常出现许多意外现象或不理想的实验结果。诸如，某种溶液和试剂失效，或某种微生物生长不好等等。因此，每个实验项目都应当提前预做一次，确保实验结果准确、无误，以保证实验教学质量。
2.2认真做好实验教学前期准备工作
实验教学的前期准备工作，除严格进行预实验外，尚需认真检查显微镜和仪器设备、玻璃器皿及溶液、试剂等，以及实验桌凳的完好状态。2.2.1显微镜的检查要点实验课前认真检查：普通光学显微镜机械部分的镜臂、物镜转换器、载物台、标本夹、粗细调节器，以及光学系统的目镜、物镜和聚光镜的完好情况，尤其是要仔细检查调节器的灵敏度和油镜的清晰度。2.2.2实验用仪器设备完整性的检查实验课前应当认真检查仪器设备的完整性。在实验教学过程中最忌讳出现缺东少西，以及仪器设备和物品质量不合要求的现象[7]。每堂实验课所需的所有物品，都应当备足有余，所用仪器设备都要保持运转良好。实验用仪器及物品完整性检查工作是相当繁琐的，工作量也很大。举例说明，微生物学实验课的前3个实验项目，即光学显微镜的使用与革兰氏染色法、细菌运动性及其荚膜观察、酵母菌的死活鉴别，以及放线菌、霉菌制片与细菌计数，所用的滴瓶总计200多个，需要逐个地进行严格检查：胶头是否漏气，瓶中的试剂是否失效、够用，滴芯是否能顺利地取出(发现沉淀和结晶应及时清洗)，标签变色严重的还要及时更换。其他仪器设备及实验桌凳的完好状态也都应当进行认真检查，如逐一检查每个实验凳脚是否松动，并及时拧紧等。2.2.3玻璃器皿一定要洗刷干净微生物实验教学所用的玻璃器皿数量很大，如试管、培养皿和三角烧瓶及载玻片等数以千计。用来盛装微生物培养基的大量试管、培养皿和三角烧瓶，有一丁点不干净就会生长霉菌；有的如载玻片上黏附了香柏油，洗刷难度很大。所以，玻璃器皿的洗刷工作是十分重要而艰巨的。玻璃器皿的全部洗刷工作都是教师与同学们共同完成的。洗刷后的检查工作采用对着阳光以流水冲洗的方式进行，确保每一个玻璃器皿干净明亮。其具体安排程序如下：玻璃器皿经学生洗刷后，再由同学进行检查，最后由教师抽样检查。这样，不仅保证了玻璃器皿的干净度，还培养了学生掌握高精度清洗器皿的基本技能及严谨的科学作风。
3重视并完善解决实验课堂上出现的问题
对于在微生物实验教学过程中经常出现的一些问题，必须认真分析原因，并及时想办法解决。在出现的问题中，有些是属于实验内容及其技术方法问题，但常常碰到的是一些由于学生缺少应有的素质或经验所造成的，都应该及时分析并适当解决之。诸如，有的显微镜粗锣旋缝隙里有许多油渍，究其原因是由于同学们的手不够清洁所造成的；为此，便要求学生在使用显微镜之前，一定要洗手。再如，个别同学有时将实验用的标本片丢落在载物台上，为了避免类似情况再次发生，便要求学生每次实验结束后一定要清点一下标本片的数量。第三，当发现个别学生把台微尺扔到放有载玻片的锅里，为此便不再将其摆放到学生的座位上，而是现场把台微尺发放给每一组同学，并讲明其价格昂贵，应当细心使用，轻拿轻放，课后由课代表统一交给老师核查。第四，有的学生把双层瓶（重层瓶）的玻璃帽和装有结晶紫的滴蕊拧碎，为了避免类似情况再次出现，每次上课前都要把其逐一擦拭，并检查每一个滴瓶的滴蕊是否松动。
4实验教学管理工作者,必需树立为教学服务的理念
药学微生物是一种药物制剂,药物分析,对重要的专业基础课程的专业之一。侧重于细菌,放线菌,真菌,病毒和其他微生物,基本微生物培养技术中,药物制剂的消毒,杀菌处理,药品和其他内容微生物检验的各个方面的生态。药学微生物重点高职院校是培养学生掌握一定的技巧。微生物理论,传统的教学方法大多是教为主,大多是“一书中,一支粉笔,一张嘴”的单一教学模式,微生物繁殖不生动,形态逼真的内容,体育展示给学生。此外,教学条件,不能好学生的技能。出于这个原因,许多教师以提高教学效率做了很多工作。如制图,时间等因素的影响程度,由后用长挂图也变得模糊,并不能体现空间感。这样一来,学生们会觉得微生物“看不见,摸不着”很抽象,难以理解,微生物类变得乏味。随着科学技术的发展,微课教学的兴起。在继承传统教学方式中合理教学手段的同时,逐步引入幻灯片,教学视频等教学设备,教学内容枯燥生动,可视化,提高了学生在学习中一定程度的兴趣。微课教学正越来越多地应用到课堂教学中的微生物制药,呈现了丰富的课堂教学方法和教学多维空间。用图,文,声,像,传播的模式的各种文字,图形,图像,动画,视频,音频等信息的集成,生动,直观,表达教学内容切合实际的方式,大大提高了信息内容课堂教学中,克服了传统枯燥和教条式的教学,提高主动学习的学生的兴趣,激发学生的想象力,从而极大地提高教学效率。
2微课教学的优势
2.1微课教学提高了实验操作的成功率
在做一些实验教学,你可以实验原理,实验演示中显示的视频动画的形式,连同解释,使一些问题无法厘清的传统教学已经成为简化,学生容易理解。可以由学生自己和实验操作等关键信息的原则进行控制,如果学生不理解的部分,可反复观看这一部分,教师需要作出必要的解释和指导,减少对演示的复杂性操作时,在实验的成功率通常将改善。
2.2微课教学提高了学生对实验的兴趣
兴趣是最好的老师。实践证明,学生感兴趣的学习内容可以激发学生的学习热情,使学生变被动学习为主动学习,但不觉得学习是一种负担。主要由微缩文字,图像,动画,声音和教学等手段来实验教学,可以使实验具体,生动,动态显示方式,便于学生观察,探究实验产生的直觉,感知和思维,激发学生的学习兴趣在学习上。
2.3微课教学有助于反馈实验信息
作为一个完整的实验教学的教堂,应该贯穿于整个教学过程的评价反馈,所以老师在课件设计过程中,根据学生的实验中,利用微课教学方法相结合的实验教学过程。通过成像技术,将展示在大屏幕上的学生实验操作,让学生进行讨论,实验操作的分析是标准化的,实验结果是合理的,这与传统的测试,直观,生动的对比。通过这些互动,学生的思维能力的提高,培养学生的创新能力,同时也有效地检测实验教学效果和学生掌握知识的程度。
3运用微课教学的注意事项
3.1课件设计突出重难点,切忌繁琐、冗长、过于华丽
传统医药微生物学教学的教师由参考书,口语教学的重点,难点的手段来解释,这是困难的学生在课堂上留下深刻的印象,不利于知识的掌握程度。合理利用微型教学,解决一些传统教学的问题。利用微课,教师要备课时要注意,教学内容设计合理的幻灯片,紧扣考试大纲,抓住重点,突出难点。如使用的不同的字体颜色,大小不同的文字,但也乐音斑点,视频等。在此基础上,再加上容易理解老师的讲解,学生很容易弄清楚的重难点内容,容易掌握。微课的课件设计应清晰,美观,有层次感,短,但并不复杂。没有太多的文字,字体要清晰,厚重,要与背景色对比强烈,以及为避免视觉疲劳要注意色彩搭配协调。你可以使用一些小插曲,但不是太夸张了。总体来讲,涉及微课课件画面,然后选择你要简单,明了,没有过多繁琐的新奇的电影,太华丽,以避免分散学生,学生的注意力,以教学内容的干扰的注意。
3.2微课教学是辅助工具,教师是主导,学生是主体
微课教学的应用和发展,在文字,图像,声音等信息的集成,同步输出,同时超越了时间和空间的界限,带领学生到微观的现实世界,感受真正的实验环境。如果忽略微类是一个辅助工具,以教师为主导,学生主体这一点上,整个教学过程中全部使用CAI播放模式,这将导致在一个单一的教学模式,导致学生在盯着文字,图像屏幕上,听着语音音频,形成了典型的计算机为主导的模式,老师只是计算机操作员,像一个剧场观众的学生,这种机械枯燥的教学,不仅模式降低了学习的学生的利益,也影响智力发育学生。因此,使用微课教学是不是教学的唯一模式,教学方法和微课教学的教学方法仍是传统的组合,以确保教师为主导,而学生主体地位,配套使用微课教学。形成生动活泼,丰富多彩的教学环境。
4结语
1、论文份数：一式三份。一律要求打印。论文的封面由学校统一提供。纸张型号：a4纸。a4210×297毫米。页边距：天头(上)20mm，地角(下)15mm，订口(左)25mm，翻口(右)20mm。统一使用汉语：小五号宋体。分割线为3磅双线。
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(9)注释：4号黑体，内容为5号宋体。
(10)附录：4号黑体，内容为5号宋体。
(11)参考文献：另起页，4号黑体，内容为5号宋体。
参考范文：
微生物实验室菌种复苏传代保存流程分析
摘要：微生物实验室中的菌种管理工作是一件非常重要的工作环节，对微生物实验结果的影响具有非常重要，为提高实验室的工作质量、加强对微生物菌种的保管质量，根据相关工作经验和调查结果对现有的实验室菌种保存及管理模式进行改进，从而形成一个科学、规范、合理的微生物实验室菌种复苏、传代、保存体系是一件非常重要的事情，从而促进我国微生物实验精确度提升，增强相关工程管理质量的规范程度，为我国医药行业发展及生产质量提高创造良好的条件。
关键词：菌种复苏；传代；保存
微生物实验是我国建筑医药研发及生产的重要环节，是确保我国医药研发行业发展的关键基础。根据药典中的标准，微生物实验室对于新引进的培养基需要通过灵敏度测试后才能投入使用；另外，在对无菌实验成果进行检查时需要使用金黄色葡萄球菌作为对比参照，而在对日常灌装环境质量检测时需要使用环境菌进行辅助检验。由此可见，菌种为微生物实验中非常关键的因素，所以必须要建立起一个科学、健全的微生物实验室菌种的复苏、传代及保存体系。
1用具与设备
接种环，接种针，酒精灯，电热恒温培养箱，生化培养箱，冰箱，灭菌柜，超净台，液氮罐，超低温冰箱，1.5mL冻存管，试管等。
2菌种的复活
应在环境洁净度D级下的局部洁净度不低于B级的单向流空气区域内或隔离系统中进行，其全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染，制备F1，（接收到合适菌种准备使用时，应根据菌种/细胞株的说明书制备复活的培养基对标准菌株、细胞株进行复活。清洁安瓶（可用75%乙醇）后，用砂轮在安瓶的上部1/3处划线，用干燥的无菌纱布包裹安瓶，将安瓶打开。用一无菌吸管吸取0.5-0.8mL适量的液体培养基（生抱梭菌用液体硫乙醇酸盐培养基；大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、短小芽胞杆菌、铜绿假单胞菌和枯草芽抱杆菌用胰酪大豆胨液体培养基；白色念珠菌、黑曲霉用沙氏葡萄糖液体培养基）滴加到安瓶中，轻轻旋转安瓶并吹打，使冻干菌种和液体培养基充分混合并完全溶解，再将安瓶内的菌液转移至相应的培养基中，根据菌种类型将其放入适宜的培养条件[需氧菌培养温度（30-35）℃，18-24h；真菌培养温度（20-25）℃，3-5d下培养，观察培养基是否浑浊，浑浊说明菌种复活生长，此为F1，如不浑浊，需氧菌应延长培养时间至5天以上，真菌应延长培养时间至7d以上，仍不浑浊，按121℃，30min条件火菌处理，再对复活后的标准储备菌株进行纯度和特性的确认。
3菌种的传代
菌种是微生物实验中的重要辅助工具，所以其质量非常重要，每一个菌种在使用前都需要进过严格的测评才能投入实验中。微生物实验是一项对严谨性和精确性要求非常高的工作，所以对于试验中要用到的每一类菌种的复苏、传代和保存都有一套非常严格的标准及原则，已经透过严格检定、确定与相关条件相吻合的菌种才能执行传代步骤。另外，传代工作流程在实际操作时也有非常严格的要求，传代次数不宜过多，且要减少不必要的传代工作，同时还要对传代时的温度进行合理调控。
4菌种的保藏
在菌种的复苏及传代工作完成后，实验室中的菌种管理工作体系已经进入最后一个环节，这一环节同样是保证菌种质量及功效的重要步骤。而在实验室的当中对菌种进行保藏的方法有很多，下面笔者就对几种实验室中常见的菌种保藏方法进行简要阐述。
4.1甘油冷冻管保藏法
甘油冷冻管保藏发是在实验室中一种非常常用的保藏手段，该方法的具体操作方法是使用无菌接种环对菌种表面的菌苔进行刮取，然后利用接种环接触试管的方式使细菌通过与试管壁的轻度摩擦向事先准备好的放置于试管内部的无菌蒸馏水中传输，或直接将菌放置于培养基当中，同时还要对菌液的浓度进行调节，然后在调配完成后的菌悬液中添加体积相等、浓度标准是30%的无菌甘油，从而得出15%的甘油菌悬液。在操作过程中要保证所使用的甘油浓度保持在一个较低的程度，如果甘油浓度高于实验标准将会造成细菌细胞渗透压力产生变化，最终导致细菌发生死亡的问题。在细菌传导完成后需要对试管进行振动和摇荡，在摇时要注意对力度的控制，让试管内的各种物质达到充分融合，再将融合后的溶液分别放置于无菌小试管中，最后将制作完成的甘油冷冻管放入-20℃的低温环境中进行预冻处理，并将其放在低于-80℃的超低温环境中存放，且要保证冰箱的温度至少为-30℃，其在这种冷冻环境下通常能够保留的时长为2a，而乙型溶血性链球菌对保存温度的要求较高，在超低温环境下该菌种的可保存时长为3个月。
4.3斜面低温保藏法
斜面低温保藏法是一种过渡性较强的保藏方法，其保藏时间较短，该方法是通过将菌种转移至条件合适的试管培养基上，或将其转接在茄子瓶的固体培养基斜面上进行培养，在菌种成长到一定程度之后再将其放入2-8℃的温度环境中进行保存。而微生物菌种的类型不同，其保存时间长短也会有所差别。然而，这种保藏方法有一个非常突出的劣势特点，就是采用这种方式进行保存的菌种极易发生状态改变，如果菌种发生变异会对其后期传代效果造成影响，使菌种受到污染。所以，这种方法只能在需要保藏时间较短的菌种类型的保藏工作中使用，并且还要对菌种的保藏状态进行随时检查。
4.4液氮超低温保藏法
4.4.1制备菌悬液
将需要保藏的菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，适宜温度培养，当菌落健壮地长满斜面时取出。配制30%的甘油溶液进行121℃下高压火菌30min，将生长良好的菌种斜面用生理盐水制成菌悬液，菌浓度控制在107左右，然后加入等体积甘油水溶液混匀后制成15%的甘油菌悬液。
4.4.2分装菌悬液
把购买的1.5ml的塑料冻存管拧松管帽置一烧杯中，外扎纱布、牛皮纸包扎好进行121℃高压火菌30min。然后将制备好的菌悬液分装至1.5mL的塑料冻存管中，每支冻存管加入1mL菌悬液，拧紧管帽，并用胶布封口，分别在胶布和冻存管上做好菌种标记。
4.4.3液氮保藏
将菌液保持在0摄氏度的状态，然后将有关设备放置到零下70摄氏度左右的冰柜立面，然后进行降温。接着将相应的冻存管放入到液氮罐妥善的保存，并且在罐的外面做好详细的标记工作，为以后使用菌种带来方便。当液氮中所存在的菌种需要复苏时，这时操作人员就应当将菌种提出来，放置到大约35-40摄氏度的环境里面进行充分的搅拌，从而达到解冻的目的。为了避免菌种出现污染的情况，操作人员需要用75%的酒精进行擦拭，当表面完全干燥以后就可以使用相应的容器将菌液按种到相应的培养基上做好培养工作。
结束语
综上所述，对微生物实验室中的菌种进行保存的方法有很多种，这些方法的正确使用对菌种的保存质量的提高具有积极作用。然而，若方法使用不合理使菌种的保存质量严重降低，不但无法达到有效提高菌种保存效果的目的，还会造成适得其反的结果，因此一定要建立起科学规范的菌种复苏、传代和保存体系，这样才能有效提高菌种保藏的科学性和规范性，以促进微生物实验室检验效率的提高，增强实验结果的精确性，为微生物实验工作的完善奠定基础，从而推动该行业在我国快速发展。
参考文献
[1]王燦.微生物实验室菌种管理和使用经验探讨[J].生物技术世界，2015（1）：8-8.
[2]陈晓燕，林光.微生物实验菌种保存方式探讨[J].临床合理用药杂志，2014（29）：129-130.
作者：尹桂丽 徐建宝 周艳艳
[论文摘要]：目前，微生物采油技术引起了微生物学界、石油工业界、石油地质界和地球化学界等相关学科的广泛兴趣和关注。详细介绍微生物采油技术概况，明确分析微生物采油技术概况机理，并探讨其发展方向。
微生物原油采收率技术(microbialenhanancedoilrecovery，MEOR)
是利用微生物在油藏中的有益活动，微生物代谢作用及代谢产物作用于油藏残余油，并对原油/岩石／水界面性质的作用，改善原油的流动性，增加低渗透带的渗透率，提高采收率的一项高新生物技术。该项技术的关键是注入的微生物菌种能否在地层条件下生长繁殖和代谢产物能否有效地改善原油的流动性质及液固界面性质。与其它提高采收率技术相比，该技术具有适用范围广、操作简便、投资少、见效快、无污染地层和环境等优点。
一、微生物采油技术概况
1926年，美国科学家Mr.Beckman提出了细菌采油的设想。1946年Zobeu研究了厌氧的硫酸盐还原菌从砂体中释放原油的机理，获得微生物采油第一专利。I．D．shtum(前苏联)及其它国家等学者也分别作了大量的创新性工作，奠定了微生物采油的基础。美国的Coty等人首次进行了微生物采油的矿物试验。马来西亚应用微生物采油技术在Bokor油田做先导性矿物试验，采油量增加了47%。2002年至2003年，我国张卫艳等在文明寨油田进行了微生物矿场应用，累计增产原油1695t，累计少产水1943t，有效期达10个月。
美国和俄罗斯在微生物驱油研究和应用方面，处于世界领先地位。美国有1000多口井正在利用微生物采油技术增加油田产量，微生物采油项目在降低产水量和增加采油量方面取得了成功。1985年至1994年，俄罗斯在鞑靼、西西伯利亚、阿塞拜疆油田激活本源微生物，共增产原油13.49x10t，产量增加了10～46％。1988年至1996年，俄罗斯在11个油田44
个注水井组应用本源微生物驱油技术，共增产21x10t。
20世纪60年代我国开始对微生物采油技术进行研究，但发展缓慢。80年代末，大庆油田率先进行了两口井的微生物地下发酵试验(30℃)。大港、胜利、长庆、辽河、新疆等油田与美国Micro～Bac公司合作，分别进行了单井吞吐试验。1994年开始，大港油田与南开大学合作，成功培育了一系列采油微生物，该微生物以原油和无机盐为营养，具有降低蜡质和胶质含量功能，并在菌种选育与评价、菌剂产品的生产、矿场应用设计施工与检测等诸方面取得了成绩。1996年以来，吉林油田与13本石油公司合作，探究了微生物采油技术在扶余油田东189站的29口井进行的吞吐试验，21口井见效，见效率达70%。2000年底，大庆油田采油厂引进了美国NPC公司的耐高温菌种，在Y一16井组进行了耐高温微生物驱油提高采收率研究和现场试验，结果表明，采收率达43.41%，增加可采储量1.81×10t，施工后当年增油615.5t。胜利油田罗801区块外源微生物驱油技术现场试验提高采收率2.66%。
二、微生物采油技术机理
（一）微生物采油技术与油田化学剂
在大庆油田开发的各个阶段都会使用不同性质的化学剂，现以大庆油田为例。当大量化学剂进入油藏后，将发生物理变化和化学变化，对微生物采油过程可能产生不同的影响。化学剂既可引起微生物生存环境（渗透压、氧化还原电位、pH值）的改变，又可直接改变生物的生理（呼吸作用、蛋白质、核酸及影响微生物生长的大分子物质的合成）以及影响微生物细胞壁的功能，从而影响微生物的生长，降低采收率。
（二）微生物驱油机理
因为，微生物提高原油采收率作用涉及到复杂的生物、化学和物理过程，除了具有化学驱提高原油采收率的机理外，微生物生命活动本身也具有提高采收率机理。虽然目前的研究不断深入，但仍然无法对微生物采油技术各个细节进行量化描述，据分析，主要包括以下几个方面：
1.原油乳化机理。微生物的代谢产物表面活性剂、有机酸及其它有机溶剂，能降低岩石一油一水系统的界面张力，形成油一水乳状液（水包油），并可以改变岩石表面润湿性、降低原油相对渗透率和粘度，使不可动原油随注入水一起流动[1引。有机酸能溶解岩石基质，提高孔隙度和渗透率，增加原油的流动性，并与钙质岩石产生二氧化碳，提高渗透率。其它溶剂能溶解孔隙中的原油，降低原油粘度。
2.微生物调剖增油机理。微生物代谢生成的生物聚合物与菌体一起形成微生物堵塞，堵塞高渗透层，调整吸水剖面，增大水驱扫油效率，降低水油比，起到宏观和微观的调剖作用，可以有选择地进行封堵，改变水的流向，达到提高采收率的效果。在较大多孔隙中，微生物易增殖，生长繁殖的菌体和代谢物与重金属形成沉淀物，具有高效堵塞作用。
3.生物气增油机理。代谢产生的CO、CO2、Nz、H、CH和C3H等气体，可以提高地层压力，并有效地融入原油中，形成气泡膜，降低原油粘度，并使原油膨胀，带动原油流动，还可以溶解岩石，挤出原油，提高渗透率。
4.中间代谢产物的作用。微生物及中间代谢产物如酶等，可以将石油中长链饱和烃分解为短链烃，降低原油的粘度，并可裂解石蜡，减少石蜡沉积，增加原油的流动性。脱硫脱氮细菌使原油中的硫、氮脱出，降低油水界面张力，改善原油的流动性。
5.界面效应。微生物粘附到岩石表面上而生成沉积膜，改善岩石孔隙壁面的表面性质，使岩石表面附着的油膜更容易脱落，并有利于细菌在孔隙中成活与延伸，扩大驱油面积，提高采收率。
（三）理论研究
1.国内外的数学模型。20世界80年代末，国外的Islam、Zhang和Chang等建立了微生物采油的数学模型并开展了相应的数值模拟研究。Zhang模型优于Islam模型在于可描述微生物在地层中的活动，却难于现场模拟。Chang模型是三维三相五组分，能描述微生物在地层中的行为，不能描述在油藏中的增产机理。
2.物理模拟。物理模拟研究基本上是应用化学驱的物理模型试验装置及试验过程。微生物驱油模型的核心是岩心管部分，其长度影响微生物的生长繁殖。应建立大型岩心模型，使微生物充分繁殖，便于分析研究微生物的驱油效果。通过物理模拟研究微生物驱油法，可获得微生物在岩心中的推进速度及浓度变化，对岩心渗透率的影响等信息。
（四）源微生物的采油工艺
国内油田（大庆等）已进人高含水开发期，是采用内源微生物驱油还是采用外源微生物驱油，要根据具体油藏内的微生物群落进行分析。若具体油藏中内存在有益微生物驱油的微生物群落，宜采用内源微生物驱油工艺，这是目前国内致力于运用最新微生物采油技术。
三、结语
综上所述，在我国油田中，特别是大庆油田，在微生物采油技术具有提高采收率的效果，对大多数的油藏都能充分发挥微生物采油的优势。制约微生物采油技术的主要因素在于油藏中微生物群落结构、现场试验工艺及物理模拟实验的局限性。外源菌种的选育和评价指标、特性，微生物的研究、菌液的生产和矿场试验等方面还需深化。
参考文献：
论文摘要：代谢组学是效仿基因组学和蛋白质组学的研究思想,对生物体内所有代谢物进行定量分析,并寻找代谢物与生理病理变化的相对关系的研究方式。本文在介绍代谢组学基本含义的基础之上，对代谢组学的研究方法及其在环境微生物领域的研究进展进行了评述。
一、代谢微生物概述
代谢组学(metabonomics/metabolomics)是效仿基因组学和蛋白质组学的研究思想,对生物体内所有代谢物进行定量分析,并寻找代谢物与生理病理变化的相对关系的研究方式,是系统生物学的组成部分。其研究对象大都是相对分子质量1000以内的小分子物质。先进分析检测技术结合模式识别和专家系统等计算分析方法是代谢组学研究的基本方法。化学分析技术中最常用的是1H核磁共振(1HNMR)以及色谱(毛细管电泳)-质谱联用(X-MS)。目前代谢组数据处理的主要方法是:应用主成分分析(PCA)等将从原始图谱信息或预处理后的信息进行归类,并采用相应的可视化技术直观地表达出来;建立类别间的数学模型,使各类样品间达到最大的分离,并利用建立的多参数模型对未知的样本进行预测;最终建立可利用的该领域的应用数据库和专家系统。应用代谢组学可进行疾病诊断、对药物进行毒性评价和研究植物细胞代谢等。
二、代谢组学的研究方法
代谢物组学分析中,对于不同类型的代谢产物,往往要采取不同的分析方法进行研究。目前,代谢物组学通常采用红外光谱法(infraredspectroscopy,IR)、核磁共振(nuclearmagneticresonance,NMR)、质谱(massspectrometry,MS)、高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography,HPLC)以及各种技术的耦联,如气象色谱耦联质谱(gaschromatography2massspectrometry,GC/MS)和液相色谱耦联质谱(liquidchromatography2massspectrometry,LC/MS)来分析研究代谢物并为其绘制图谱。这些技术的耦联可以提高对样品的分辨率、敏感性及选择度,有利于对更多的生物体系内的代谢物绘制图谱。一般来说,选择代谢物组学分析方法时,其原则是要同时考虑仪器和技术的检测速度、选择性和灵敏度,找到一种最适合目标化合物的方法。
三、代谢组学在微生物领域的研究进展
(一)微生物分类,突变体筛选以及功能基因研究
经典的微生物分类方法多根据微生物形态学以及对不同底物的代谢情况进行表型分类。最近,随着分子生物学的突飞猛进,基因型分类方法如16SrDNA测序,DNA杂交以及PCR指纹图谱等方法得到了广泛应用。然而,某些菌株按照基因型与表型两类方法分类会得出不同的结果。因此,根据不同的分类目的联合应用这两类方法已成为一种趋势。BIOLOG等方法在表型分类中应用较为广泛,但是,代谢谱分析方法(metabolicprofiling)异军突起,逐渐成为一种快速、高通量,全面的表型分类方法。采用代谢组分类时,可以通过检测胞外代谢物来加以鉴别。常用的胞外代谢物检测方法为样品衍生化后进行GC2MS分析、薄层层析或HPLC2MS分析,最后通过特征峰比对进行分类。Bundy等采用NMR分析代谢谱成功地区分开临床病理来源以及实验室来源的不同杆菌(bacilluscereus)。除了表型分类外,代谢组学数据可以应用于突变体的筛选。在传统研究中的沉默突变体(即未发生明显的表型变化的突变体)内,突变基因可能导致了某些代谢途径发生变化,通过代谢快照(metabolicsnapshot)可以发现该突变体并研究相应基因的功能。
(二)发酵工艺的监控和优化
发酵工艺的监控和优化需要检测大量的参数,利用代谢组学研究工具可以减少实验数量,提高检测通量,并有助于揭示发酵过程的生化网络机制,从而有利于理性优化工艺过程。Buchholz等采用连续采样的方法研究了大肠杆菌在发酵过程中的代谢网络的动力学变化。他们在葡萄糖缺乏的培养液培养的大肠杆菌中加入葡萄糖,并迅速混匀,按每秒4～5次的频率连续取样。利用酶学分析、HPLC/LC2MS等手段监测样品中多达30种以上的代谢物、核苷以及辅酶,从而解析了葡萄糖以及甘油的代谢途径和底物摄取体系。通过统计学分析建模,发现在接触葡萄糖底物后的15～25s范围内,大肠杆菌体内发生的葡萄糖代谢物变化与经典生化途径相符,但随后的过程则与经典途径不符,推测可能存在新的未知调控步骤。Takors认为,通过上述代谢动力学研究,掌握代谢途径及网络中的关键参数,将直接有利于代谢工程的优化,包括菌株的理性优化以及发酵参数的调控。
(三)环境微生物研究
微生物降解是环境中去除污染物的主要途径。深入了解污染物在微生物内的代谢途径,将有助于人们优化生物降解的条件,从而实现快速的生物修复。这些代谢中间体大都通过萃取、分析方法进行逐个研究,并借助专家经验拟合出代谢途径,其动力学过程亦很少触及。代谢组学方法的采用有可能改变这一现状。Boersma等采用代谢组学方法研究氟代酚的微生物降解途径。氟代化合物具有特殊的19F核磁共振属性,19F的核磁共振灵敏度与1H核相近;由于生物体内无内源性19F核磁信号,因而无本底干扰。所有19F核磁信号均可归结于异生素及其代谢物。19F核的化学位移值宽,约为700ppm(1H为15ppm,13C为250ppm)。较宽的化学位移导致19F在不同取代物的峰图不易产生重叠。因此,借助核磁共振技术可以更方便地研究含氟化合物的代谢中间体。Boersma等根据总代谢物的核磁共振图谱,推测出红球菌内羟化酶在不同的取代位(1,2,3三种不同的取代数量)羟基化氟代酚,然后再通过儿茶酚内位双加氧酶开环形成氟代粘糠酸的代谢过程。此外,他们还首次检测到开环后的下游代谢物,即通过氯粘糠酸异构酶生成氟代粘糠酸内酯以及氟代马来酸等中间代谢物。根际(rhizosphere)空间在植物2微生物相互作用中发挥着重要的作用。Narasimhan等利用根际代谢物组(rhizospheremetabolomics)方法,阐释了植物分泌物对根际微生物降解多氯代酚(PCB)的作用机制。然而,在采用拟南芥突变体(产生较少的phenylpropanoids)的对照组中,降解菌的数量较低,降解率也仅达50%。结果表明植物根际分泌的次级代谢物促进降解菌的繁衍增殖,从而促进了污染物的降解。
此外,微生物代谢组学还应研究如何改进样品的制备方法。例如,在代谢组研究中,为了中止细胞代谢反应采用冷淬火(coldquenching)方法,将细胞样品迅速置于低温(液氮或-70℃甲醇中),这会导致许多微生物发生冷休克(cold2shock),释放出大量的胞内物质,引起代谢组学定量研究发生偏差。
参考文献：
[1]周宏伟,谭凤仪,钟音,栾天罡.代谢组学及其在微生物领域的研究进展[J].分析化学.2007(2).
居家护理发展不均衡，管理制度不规范：我国大陆地区的居家护理仍处于初级发展阶段，各地市都处于对居家护理的探索状态，尚未形成规范的管理制度，家庭护理服务市场比较混乱。目前大陆地区开展的居家护理服务主要有2种方式：①由社区卫生服务中心的护士为患者提供一般常见病的居家护理服务；②通过医院为出院患者提供延续性的护理服务，包括饮食、运动、药物及专科护理指导，但惠及人群有限，患者仍需定期到医院［2］。中国港台地区的居家护理服务受国外影响，发展较为完善。中国台湾自20世纪70年代开始实行居家护理，目前已形成由政府、非营利机构、营利机构和社区共同构成的较为完善的多元化服务体系［8］。中国台湾的居家护理是由专业的医师及居家护师构成有组织、有系统的医疗服务团队，为个体提供合适与阶段性的居家护理。服务对象包括出院后仍需继续照顾的患者，长期患病需居家医疗的患者，病情稳定能在家中进行医疗措施者。在中国香港，有庞大的社工、义务团体作为后盾，保证医院延伸（居家）护理工作的顺利运作［2］。医疗保险体系不完善：我国尚未建立长期护理保险制度，居家护理的费用没有纳入社会保险报销范畴。出院后医保支付比例比住院时低，特别是一些慢性病患者需要的护理项目没有被覆盖，使得患者选择居家护理的意向降低。且三级医院尚无居家护理的规范收费项目。居家护理人才缺乏：居家护理要求护士不仅要掌握相关的医疗护理保健知识，还要有较强的沟通能力、管理能力和敬业精神。在我国，居家护理主要由社区护士承担。面对迅速增长的居家护理需求，护理人员数量严重不足。另一方面，我国社区护理人员大多未受过专门的居家护理培训，普遍存在知识老化、能力欠缺的问题。社会对社区护士的不信任：长期以来，社区卫生服务机构技术水平的相对落后使得大多数人对社区护士的护理服务持怀疑态度，从而影响社区家庭护理工作的开展。
2在我国发展居家护理的必要性
我国人口呈现出老龄化、高龄化的态势。与此同时，随着独生子女家庭的增多，“四二一”模式已经非常普遍，独生子女婚后要同时照顾老人和孩子，负担很重，导致家庭护理功能下降。三级医院虽然有明显的技术优势，但由于病房床位紧张和高昂的医疗费用，使很多老年慢性疾病患者不能很好地享受到有效和有限的医疗资源。加之医疗报销制度的改革和有些家庭因经济困难对医院住院的费用难以支付，有些老年病、慢性病患者希望能在家庭中得到治疗和护理。因此实施老年患者居家护理，为其提供安全而熟悉的环境，更有助于老年患者的身心健康，减轻其经济负担和家庭压力［2］。
3在我国发展居家护理的建议
3．1加大政府对于居家护理的政策支持：在英国和日本，政府在居家护理服务发挥着主导作用，特别是在居家护理资金方面给予大力支持，使得居家护理队伍得以壮大，居家护理模式渐趋完善。《中国护理事业发展规划纲要（2011—2015年）》中明确提出，需进一步完善医疗服务体系，开展长期护理服务模式，逐步建立和完善“以居家为基础、社区为依托”的长期居家护理服务体系。表明我国政府已开始重视居家护理的发展。
3．2建立健全我国的居家护理的相关法律体系：可借鉴美国、德国和日本等发达国家的经验，形成和完善长期护理保险制度，解决人口老龄化带来的护理需求和社会问题。建立居家护理服务相关的规范和相关法律政策。包括居家护理服务功能与执业范围、机构设置与执业登记、人员配备与管理、执业规则与业务管理、执业监管等，在保护患者权益的同时保障护士安全，保证居家护理服务顺利进行［9］。
3．3规范居家护理管理，健全制度：所有居家护理服务人员必须经过严格的培训后持证上岗，以保证居家护理的服务质量，保证患者的生命安全。健全居家护理各项制度，如访视制度、入户安全制度、查对制度、交接班制度（与患者或家属）、消毒制度、护理文件书写制度、查房制度、考核评价制度等［10］。
3．4成立由医院与社区共同组成的居家服务互助指导小组：从大中型公立医院选拔具有5年以上丰富临床经验的医生、营养师、康复师和护士及社区医生、护士组成居家护理服务团队，为出院患者提供居家护理服务。并由大医院医护人员对社区医护人员进行关键技术指导。大中型公立医院与基层社区卫生服务机构共建居家护理的优势在于可为社区居民提供延续性、便捷性、实效性的护理服务。既有利于医护人员及时了解出院患者的身体状况，及时调整护理方案。也使居民足不出户就可以享受到专业的护理服务，既节省了时间，节约了医疗费用，也减轻了家属的负担。同时还可缩短患者平均住院日，提高病床周转率，帮助患者监测疾病相关指标，提高患者出院后对治疗护理的依从性，减少疾病的复发，提高患者的生活质量，提供高品质服务以满足居民日益增长的基本医疗服务需求，节约国家医疗资源［11］。
3．5重视对居家护理人才的培养：各级护理院校应借鉴国外经验，开设居家护理、老年护理学等必修课程，培养出更多高素质的居家护理人才。政府还应通过提高社区居家护理人员的工资待遇，减轻其工作压力等措施，吸引更多的护理学生选择社区居家护理。同时要加强对现有护理人员的培训，通过正规、系统的护理培训，使居家护理人员具有丰富的知识和精湛的技术，以及良好的心理素质和沟通能力，使其能为居民提供更好的居家护理服务。
3．6合理调整居家护理收费价格：合理的居家护理收费是保证“居家护理”可持续发展的关键。可借鉴德国的经验，根据每天需要护理的时间来划分护理的等级标准，根据护理等级确定护理费用。同时，为充分调动居家护理服务人员积极性，可适当提高居家护理的收费价格。政府应充分发挥主导作用，加大资金投入，建立居家护理的合理经济补偿机制，拉开居家护理与医疗机构护理的自费承担比例，让更多老人接受居家护理［12］。
3．7对居家护理效果进行监督评价：可通过电话随访和问卷调查等形式，由居家护理人员和患者实行互评机制，并将评价结果纳入居家护理报酬的支付考核范围，以提高居家护理人员的积极性和服务水平。
3．8加大居家护理宣传，增强人们对居家护理的认识：可以利用电视、广播、报纸等媒体向社会介绍居家护理的优势，提高人们对居家护理的认识，转变人们的传统健康观念，提高人们的防病、保健意识，从而促进居家护理更好地发展。
关键词：培养基质量控制微生物检测
中图分类号：R37文献标识码：A文章编号：1672-5085（2007）12-0098-03
培养基是液体、半固体或固体形式的，含天然或合成成分，用于保证微生物繁殖或保持其活力的物质。培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作的重要环节，培养基自身质量的优劣、保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。本文对微生物实验室在培养基购置、贮存、制备、使用等方面应采取的质量控制措施进行讨论，谈一些观点和看法。希望有助于微生物检测工作的同行们更好的开展工作。
1培养基的购置与验收
1.1购置
从培养基自身的质量来看，不同生产厂家的产品，甚至同一厂家不同批号的产品都会存在差异[1]。依据ISO/IEC17025《检测和校准实验室能力的通用要求》，对培养基的供应企业进行评价后选择合格的供应商，这是培养基购买过程中重要的步骤。应选择产品市场信誉度高、有质量保证能力和服务保证能力的企业；企业是否通过了质量管理体系的认证是较为客观的评价指标。要求生产企业提供：培养基成分名称及产品编号、批号、使用前的pH、储藏信息和有效期、性能评价和所用测试菌株、技术数据清单、质控证书以及必要的安全/危害数据等材料[2]。
1.2验收
购买的培养基到货后，应有专人做好接受和验收工作，应仔细核对生产企业提供的资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。每批培养基到货物后都应对培养基的质量进行检测，满足检测方法规定的要求后方可投入使用。
2培养基的储存
干粉培养基应保存在阴凉干燥处，要避免阳光直射；未开瓶的培养基在室温下的最长保存2年，开瓶后的干粉培养基易吸湿，应注意防潮并在6个月内用完。应定期对储存中的培养基进行常规检查，如容器密闭性复查、首次开封日期、内容物的感官检查，如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象就不能再使用。
3培养基的制备
3.1培养基用水
培养基制备用水应使用电阻率不小于30万Ωcm的蒸馏水或与其同质的水，最好不使用离子交换器生产的去离子水[2]。。
3.2称量
称量时要用专用的角匙，避免交叉污染而影响检验结果；干粉培养基易吸潮，如有条件，尽量在湿度较低的房间称取培养基。
3.3复水
复水时不得用铜锅或铁锅，以防有离子混入培养基中，影响微生物的生长；容器的大小需大于复水后培养基总体积的2倍以上，避免在加热溶解过程中，培养基溢出；含有琼脂粉的培养基，在加热溶解之前可以浸泡数分钟；加热培养基时一定要进行搅拌，特别是琼脂类培养基。为避免烧焦和沸腾溢出，对于少量的培养基最好使用沸水浴进行加热。烧糊的培养基营养物质被破坏，并可产生有毒物质，如发现焦化，或未溶解均匀前培养基有溢出，该培养基即不能使用，应重新制备。对于琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热，最多只能加热两次，第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去。
3.4灭菌
一般培养基采用湿热灭菌，即高压蒸汽灭菌，通常是121℃15min，含糖或特殊培养基，按照国家标准或生产商提供的说明灭菌。已配制好的培养基必须立即灭菌，避免微生物生长繁殖而消耗养分，改变培养基的酸碱度。高温可破坏培养基的营养成分，还会使琼脂的凝胶强度下降，因此必须严格控制灭菌温度和时间，并且不可重复灭菌。高压蒸汽灭菌锅的压力表等要定期进行检定，并定期采用生物指示菌法或化学变色纸片对灭菌效果进行验证。
3.5pH测定
微生物必须在适宜的pH范围内才能正常生长繁殖或体现其生物特性。培养基配方要求的pH为灭菌或消毒后的pH值，即培养基使用前的pH，并应在25℃温度下采用精密酸度计进行测量，固体琼脂培养基应以特殊的胶体表面测量电极进行测量。使用过程中，如果需要调整培养基的pH，应用1mol/LNa0H或lmol/LHCL调整，注意不可反复调pH，否则会影响培养基的渗透压[3]。
3.6配制好的培养基保存
灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度，避免长时间保存在灭菌锅内，造成过度灭菌，影响培养基的营养成分或选择性效果。所配制的培养基的量，应该是在最长保存期限内正好使用完。含染料的培养基应闭光保存；倒好的琼脂平板如果配制的当天未使用完，应于冷藏保存，如果保存时间超过2天，应将其放入密封的塑料袋中保存；配好的肉汤类培养基如果保存时间超过2个星期，应将其放在带有螺旋盖的试管或其它密闭的试管或容器中防止蒸发[4]。
4培养基的性能测试
4.1外观控制
制备好的培养基应有相应的颜色，一般的培养基应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化，是否蒸发/脱水。
4.2污染控制
从每批制备好的培养基中选取部分进行污染测试（无菌试验），确定无微生物生长方可使用。
4.3性能测试
4.3.1测试菌株选择测试菌株是具有其代表种的稳定特性并能有效证明实验室特定培养基最佳性能的一套菌株，应来自国际/国家标准菌种保藏中心ATCC标准菌株[5]，菌株的选择参考卫生行业标准WS/T232-2002《商业性微生物培养基质量检验规程》。
4.3.2定量测试方法改良Miles-Misra法测试菌株过夜培养物10倍递增稀释；测试平板和参照平板划分为4个区域并标记；从最高稀释度开始，分别滴一滴稀释液于试验平板和对照平板标记好的区域；将稀释液涂满整个1/4区域，37°C培养18小时；对易计数的区域计数，按公式计算生长率（生长率=待测培养基平板上得到的菌落总数/参考培养基平板上获得的菌落总数）。非选择性培养基上目标菌的生长率应不低于0.7，该类培养基应易于目标菌生长；选择性培养基上目标菌的生长率应不低于0.1[6]。
4.3.3半定量测试方法改进的划线法接种法平板分ABCD四区，共划16条线，平行线大概相隔0.5cm，每条有菌落生长的划线记作1分，每个仅一半的线有菌落生长记作0.5分，没有菌落生长或生长量少于划线的一半记作0分，分数加起来得到生长指数G。目标菌在培养基上应呈现典型的生长，而非目标菌的生长应部分或完全被抑制，目标菌的生长指数G大于6时，培养基可接受[6]。
4.3.4定性测试方法平板接种观察法用接种环取测试菌培养物，在测试培养基表面划平行直线。按标准中规定的培养时间和温度对接种后的平板进行培养，目标菌应呈现良好生长，并有典型的菌落外观、大小和形态，非目标菌应是微弱生长或无生长[6]。
5讨论
培养基的质量是微生物实验室检测工作的基础，事关检测工作的准确性、可靠性，在微生物实验室检测工作中举足轻重。如果在工作中忽视任何一个环节的质量问题，都将导致检验结果科学性、客观性的偏离。因此，加强培养基的实验室质量控制，认真地做好培养基的质控工作，不断完善和提高培养基的质控水平，才能为微生物检测实验室提供高质量的培养基。
参考文献
[1]唐细良，史娟，唐紫琳，等.影响卫生微生物检验质量的两个因素研究[J].实用预防医学，2000，7（4）：314-315.
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[4]饶红，陈广全，冯骞，等.微生物实验室培养基的质量保证措施[J].检验检疫科学，2006，6（4）：31-33.
（一）基层卫生院物资管理制度不健全
卫生院由于重视程度不足，或是人力和物力方面的缺陷导致了其没有建立起科学合理的物资管理制度。首先最突出的问题就是没有进行责任的明确分工，一人多职的现象普遍存在，这使得问题发生时，工作人员之间互相推脱，不仅造成了员工之间矛盾的产生，也不利用责任的跟踪和追究。有的卫生院因为没有明确的职位划分，出现了凡事请求领导指示的情况，比如在进行资产的处理时，单凭领导的指示就随意出售卫生院资产，无形中造成了卫生院物资的流失。另外，当前的卫生院大多都是财务部门进行账目的管理和控制，业务部门进行实物的管理，这样的任务分配往往导致账目的记录和实际情况不完全吻合，账目真实性不能保证。除此之外，物资的购买缺乏审批，没有经过审批而购买物资往往产生购买的盲目性，出现资产闲置的情况，造成了资源的浪费。
（二）物资采购、投资、管理环节存在漏洞
基层卫生院物资采购、投资和管理方面出现的问题相比于其他问题更为突出。基层卫生院分布广、不集中，使得相关部门对卫生院的管理难度增加，管理的力度也远远不及市、县级医院，这就使得基层卫生院在物资采购和使用等方面随意性加大。有些基层卫生院在没有考虑到自己单位的财力状况和设备使用可行度的情况下，就购置了耗资多、大型的、先进的医疗设备，最后由于客观条件的制约，使得设备使用受限，无法发挥出本身的价值，造成了资金的流失。另外，基层卫生院对应收账款等应收类项目的重视度不足，他们只是看中货币资金的获得，也正因为如此，没有对应收款项进行及时的催收，呆账坏账的产生也就不足为奇了，这在一定程度上造成了基层卫生院物资的流失。
二、加强基层卫生院物资管理的建议
（一）准确定位自身实力，引进专业人才，规范固定资产的使用
首先，基层卫生院管理者要转变基层卫生院物资管理的观念，提高思想认识，在全体职工中宣传物资管理知识，强化普及医院物资管理重要性和必要性的教育，科学有效地搞好医院物资管理工作。其次，要根据目前卫生院中的现有流动资金、医护人员、医疗水平准确定位卫生院实力，合理引进医疗设备和器械，在能够满足现有的医疗现状，又不超出自身能力的前提下，优化固定资产的配置，以免造成不必要的资源浪费。再次，基层卫生院要积极引进专业医疗人才，在自身财务能力的范围之内，尽量引进有水平的医疗人员，这不仅能够提高基层卫生院的医疗水平，提升基层卫生院医护人员的医资力量，而且能够解决基层卫生院固定资产的管理和维护问题，专业的医疗人员能够从专业的角度看待问题，使基层卫生院的固定资产的管理走向正规化，改善基层卫生院目前的固定资产管理现状。最后，要对固定资产的使用和维护做出详细的规定，要把固定资产的使用与医护人员的奖惩制度联系起来，严格规范基层卫生院固定资产的使用和维护，减少固定资产的损失，延长其使用时间，使基层卫生院本身就不充裕的资金发挥出最大的作用。
（二）完善基层卫生院物资管理制度
完善基层卫生院物资管理制度可以保证卫生院工作的各个环节有章可循，有利于确保在发生问题时能够进行责任追究。首先，要明确工作内容和责任的分工，尽量避免一人多职的现象，由专门的工作人员负责单位物资管理工作，出现问题，可根据员工职责追究相关的法律责任，这样也在一定程度上减少了员工的消极怠工状况。其次，建立基层卫生院会计核算制度，选用专业的会计工作人员对物资进行管理，提高财务核算的质量。财务人员要严格遵守行政事业单位的财务规章制度，定期清点卫生院物资数目和使用现状，做到心中有数，并仔细进行账目核对，保证账目的真实性，杜绝账实不符的情况发生，确保国有物资安全与完整。最后，对卫生院物资进行处理时要严格根据规定走完各项流程，先要由专业的财务管理人员进行科学评估，然后按照程序进行申报审批，审批下来执行时，要密切对实施过程进行跟踪，进行全方位、全过程的监督和管理。
（三）加强物资使用管理，实行绩效考核制度
加大对应收款项的重视程度，而不仅仅只是重视资金的收入。物资的使用和租借要严格按照规定进行审批，并进行详细的记录，防止物资无故流失。除了对物资进行定期的清查核算外，还要重视设备的维护、维修，对资产要做到节约高效的使用，发挥出它全部的价值。基层卫生院应建立绩效考核制度，提高员工工作的积极性，考核时要保证公开公正，将工作业绩和工资挂钩，对工作能力强的员工要进行适当的奖励，为卫生院留住人才。
三、结语
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