时间：2022-04-13 13:32:15
导语：在复职申请书的撰写旅程中，学习并吸收他人佳作的精髓是一条宝贵的路径，好期刊汇集了九篇优秀范文，愿这些内容能够启发您的创作灵感，引领您探索更多的创作可能。
请求事项:_________________________
事实与理由:________________________
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此致
______人民法院
申请人:XXX(签名或盖章)
律师:XXX(签名或盖章)
尊敬的院领导：
你们好!
很遗憾在这个时候向学院提出辞职。转眼之间，来到江西师范大学科学技术学院两年了，我非常珍惜在江西师范大学科技学院的这段工作经历，也很荣幸成为科院的一员，我确信这段人生经历，将对我的人生规划以及今后职业发展产生巨大的影响。在这里非常感谢各位领导的教导和照顾。感谢科院给了我展示自我的平台和宝贵的学习机会，让我在踏进社会后第一次有了归属的感觉。
从20nn进校从事专职辅导员的工作以来，带了10法学、10对外汉语，10工商管理和10日语四个专业的学生，虽然由于专业的原因，学生的寝室分布比较零散，涉及3栋、6栋、8栋、11栋。但是我还是严格按照学院相关要求完成了学院对辅导员布置的各项工作。现在10法学专业班的同学在学生会主要职务上占到到大半的席位，我为他们的成绩感到骄傲;10工商管理专业的柳陶同学，经常找我探讨一些问题，出版了自己的诗集专著，有惺惺相惜的感觉;10对外汉语的同学两年来几乎没同学逃课，因为对文学的热爱和她们走的很近，有共同的话题，大家都相处的很融洽;该班还连续两年获得百佳文明寝室优秀班集体的称号。()10日语的班上的同学多才多艺，虽然有个别调皮的学生会上课和老师唱反调，给任课老师留下了不好的影响，但是在大学这个强调学术自由的环境里，我觉得是无可厚非的。不管我以后走到哪里都会为你们取得的成绩感到骄傲。
我利用班会的时间组织了很多次辩论，希望能锻炼胆小的同学的胆量，因为我自己就是个容易怯场的人，压不住台面是很难找到工作的。人成长的过程就是克服自己的短板的过程。对各个专业未来就业的方向以及考研方面的问题，我都通过先在班上征集问题，然后班会统一解答的方式做了较好的传达。因为我在他们这个阶段的时候也迷茫过，彷徨过，希望我的经历能对他们有所启发。
由于自己的青涩，涉世不深，喜欢和同事探讨一些问题，可能给个别领导留下了不好的印象，我在此表示深深的歉意。以后一定加强自己的在为人、处事方面的修炼。在此特别感谢刘院长的关心和厚爱，刘院长您常说的要常怀感恩之心是值得我铭记的，这也是我一直对学生的忠告。
XX年我考取了华中科技大学的博士，我本来也想像戴巍博士一样，边读博士边为师大科院继续效力，但是由于自己辅导员的工作性质，导师也要求脱产学习，只能辞职。赖书记学工例会上也说过：“能考公务员和博士的都可以去考”。这是真正的领导的气魄。因为以前辞职离开的有些同事也和学院造成了一些不愉快，我认为这样不管是对本人、还是对学院长远发展都造成了不良影响。希望能和学院在和谐的氛围中解除聘用关系。因为同事的口碑也可以成为大学的安身立命之本。在此诚挚的希望院领导能同意我的辞职。
此致
你好，我是文学院汉语言文学一班的黄婷，在青协这个大家庭的一年中，担任会长助理，在各项活动的开展中，学习了宝贵的经验和教训，对协会产生了巨大的归属感，对这种有意义的志愿服务活动有了更深刻的理解。所以，在协会换届之际，我申请担任协会副会长一职，更好的参加社团活动，也是对自己的锻炼与提高。希望可以给我这个机会。
大学生青年志愿协会，是一个纯公益性的学生社团。本着“奉献 友爱 互助 进步”的理念，已走过十五个岁月，这十五年来，不断寻找着志愿服务的新方法，新方式，以爱心为基础，以实际作为表现，在安师院内外取得很大的影响力。十五年已展开多项志愿服务活动，实现校内校外两个渠道，不断扩大服务人群，至今服务人群有在校学生，部分留守儿童小学，孤独症儿童，大龙山社区人民，并与大龙山镇政府，宜秀区林业局，马乔小学，永林小学，安庆市九中，大龙山敬老院等取得合作关系，开展大学生服务活动，并培养大学生志愿者的爱心，耐心，责任心。这样的一个协会，是我想要为之努力的。
在协会的一年里，我参加了各种活动，从协会的阳光捐衣到十五周年晚会一路走来，一直在学习和提高中，在统筹策划，与人交际上有了一定的成长。申请副会长一职，我会更加的努力，做好协会工作。我认为做好这个工作需要的不只是工作热情，还需要有责任心，而我正想担当这样一份责任。而且我对协会的接下来的系列工作有了初步的想法与规划。
具体如下:
1、开展精品活动，形成协会自己的特色活动，为这个活动，协会应该加大人员和经费投入。做好前期的筹划工作，预见活动执行中可能遇到的问题和困难。积极调动各部门的积极性。各部门要协调合作，要把目标放在整个协会的发展，而不是自己一个部门的提高。活动要做好宣传工作，扩大影响。在活动的执行过程中，一定要认真仔细。活动讲究的是质量，而不是数量，可以适当减少活动的数量，把重点放在特色活动上。这样，既可以节约活动经费，协会的影响也会更好。
2、 协会在来年招新时，应该适量向会员收取一些会费，便于活动的开展。当然，只是开源还不行，还得节流。外联部拉的赞助，每一笔钱都不容易。所以在活动中每一笔钱都要花在刀刃上，不可以浪费，尽量可以物尽其用。 而且在活动的选择上，首先要考虑到经费问题，如果经费超过了承受范围，要重新策划活动，或者选择放弃，重新选择可行的活动方案。适当减少活动的数量也是减少经费支出的重要手段。过多的活动不仅浪费经费，还会导致理事、会员产生倦怠的心理。
您们好：
即将年末，提出辞职或有不尽之意，但因家中父母年迈，妻女无人照顾，心中挂念，望领导谅解。我已思索很久，内心挣扎有月之久，最终下定决心就此辞职。回家照看父母妻女之余，另寻它途，还望领导准许。
回想北京当年，承蒙陈兄高抬于我，不嫌我才疏学浅，留用于公司。此知遇之恩，至今我铭记心中。直到09年在回公司工作至今已有近4年之久，工作之中也算尽心尽力，又想当年调至黄骅工作，心怀一腔热血，满怀胸有大志，欲助陈兄事业大升，想为自己求得安稳生活，也不枉我这些年来在外打拼，更不辜负父母养育之恩。以求得家人晚年幸福，安康。然而，今天即将要离开公司，心有感慨万千，无从表述。
我今提出辞呈原因有三。
第一
我本才识浅陋为人敦厚之人，曾在北京未有很好发展，幸遇陈兄提爱有加，使得我再次回到公司，任职言鼎高职。然而我能力欠佳，没能更好的在业务上突破自己，没能为公司带来更好的收益，心中实有惭愧。加上业务本身是我之短处，不能够发挥其能量，虽然戒慎兢业，但已是身俱心疲，现有职位工作让我难以胜任，包袱日益加重，内心压力，有增无减，实难言语。如经理业绩都没有业务人员业绩好，我又如何面对自己，如何面对领导?我自知之明 不敢占用此职位，而耽误他人前途，恐日后给公司带来人才损失。是请辞其一。
第二
回公司工作也有4年左右，东奔西走，携带妻女，随遇而安。工作中不敢怠慢，克勤克俭。想以此工作状态来回报公司，得到领导的褒奖，并予以重用。奈何落花有意流水无情，我之提出合理化建议也未能试行。又于常年伏案工作，落下职业病。使得目迷气吁，和同事之间闲聊之余，感叹青春活力已知付炬。现在想想，以我倦怠之躯，恐难日后在为公司效力。是请辞其二
第三
我本16岁出外务工至今已有15年之余，这些年在外父母没能照顾，前11月初病假探家，看望父母已是两鬓斑白花甲之年，心使泪染。初来打拼时与家人许诺，日后有所发展 定当供奉父母，使其安享晚年。而看我今日处境，离我殷实生活相差甚远。想来心有愧疚，只得当下回家中照顾父母妻女，以求心安。是请辞其三
我今提出请辞，多因自身原因 ，心有忐忑，也有所虑。人生一世，草木皆有情，人岂无义?所幸公司现在人才济济，我辞离去，也无大碍。数月后，公司会有新人添丁，亦使公司业务蒸蒸日上，谨祝各位领导，事业日新，时有进境，公司更盛，尤比往昔。
请
离
婚
登
记
声
明
书
我们双方申请离婚登记，谨此声明：
男方姓名：_________，
国籍：____，出生日期：_____年___月___日，民族：____，职业：_____，文化程度：____，身份证件号：___________________________，常住户口所在地：___________________________。
女方姓名：_________，
国籍：____，出生日期：_____年___月___日，民族：____，职业：_____，文化程度：____，身份证件号：___________________________，常住户口所在地：___________________________。
我们于_____年___月___日登记结婚，结婚证字号：_____________，离婚原因是___________________________。
我们双方自愿离婚，对子女抚养、财产、债务等事项已达成一致处理意见并共同签署了离婚协议书。
上述声明完全真实，如有虚假，愿承担法律责任。
声明人:
_________________
______年___月___日
_________________
______年___月___日
监誓人：_________________
______年___月___日
（注：声明人签名须在监誓人面前完成）
离
婚
登
记
告
之
单
一、根据《婚姻登记条例》之第十二条规定，办理离婚登记的当事人有下列情形之一的，婚姻登记机关不予受理：
（一）未达成离婚协议；
（二）属于无民事行为能力人或限制民事行为能力人的；
（三）其结婚登记不是在中国内地办理的。
二、法律责任：
（一）根据《婚姻法》第四十七条规定，离婚时，一方隐藏、转移、变卖、损毁夫妻共同财产，或伪造债务企图侵占另一方财产的，分割夫妻共同财产时，对隐藏、转移、变卖、损毁夫妻共同财产或伪造债务的一方，可以少分或不分。
离婚后，另一方发现有上述行为的，可以向人民法院提起诉讼，请求再次分割夫妻共同财产。
（二）如离婚双方当事人提供虚假证件登记的，由当事人各自承担相应的法律责任。
（三）离婚协议书一经签定不得更改，如当事人对协议规定的问题发生纠纷的，当事人可向人民法院提起民事诉讼。
（四）上述条款中未详细告之的法律责任，如有违反，将依法处罚。
请在仔细阅读并确认理解内容后签名。
申请离婚当事人：
男方：____________（签名）
女方：____________（签名）
______年___月___日
—
您们好！我是xxx班学生xx，在大学二年的学习、生活和工作中，我严格要求自己，在各个方面努力做到最好，今天，我很荣幸地递交了这份申请书，参加我院“三星”中“服务之星”评选活动，希望通过这次评选寻找与其他同学间的差距，取长补短，以期在日后的工作和学习中找准方向，增强意识，提高自我，为增添我院的学生文化生活尽自己的一份微薄之力。现将个人材料汇报如下：
一、个人简介
xx，09级人文艺术系751班学生，现任人文艺术系学生会主席团主席兼体育部部长、院学生会体育部副部长，09751班体育委员，曾担任交院足球社社长。工作认真负责，为人诚实，积极参与各项活动。通过近两年的学生会工作和一年的社团工作让我在思想、学习、工作等方面都取得了很大的进展。人生格言：生命的意义是用爱帮助更多的人！
二、感恩大学
生活应该向前看，但是回首自己在进大学这段路途上走过的脚印，心中不免感触颇多。两年来的大学生活已化成心中最美好、最难忘的回忆被珍藏。在我看来，大学生活不仅是自己的一段成长历程，更是自己的心理的成长历程、思想的成长历程和精神的成长历程。大学不仅是一所学习专业知识的地方，也是培养和塑造人格的重要平台。“世事洞明皆学问，人情练达即文章”，大学里，我们不仅要学会读书，更要学会理解和感悟生活这本无字书，对生活有所思、有所获，学会与人交往，感悟做人做事的准则。大学培养的是一种个性，学习的是一种精神。我们要在这里提高的是自己的思想政治觉悟和道德修养，完善自己的人格，做一个关注社会现实，有思想、有追求、有责任的优秀建设者。
三、服务之路
我们在刚进入一家公司时，都要从实习生做起的，实习期间辞职也是需要写辞职申请书的，实习生辞职申请书怎么写呢?下面就是小编给大家带来的实习生辞职申请书报告范例最新，希望能帮助到大家!
实习生辞职申请书报告1尊敬的_人力资源部：
您好!
由于个人职业规划和一些现实因素，经过慎重考虑之后，特此提出离职申请，敬请批准。
在_工作一年多的时间里，我有幸得到了各位领导及同事们的倾心指导及热情帮助，在本职工作和音乐专业技能上，我得到了很大程度的提高，在此感谢_提供给我这个良好的平台，这一年多的工作经验将是我今后职业生涯中的一笔宝贵财富。
在这里，特别感谢各位领导在过去的工作、生活中给予的大力支持与帮助;尤其感谢_，_等，一年来对我的信任和关照，感谢所有给予过我帮助的'同事们。
望批准我的申请，并请协助办理相关离职手续，在正式离开之前我将认真继续做好目前的每一项工作。
祝公司事业蓬勃发展，前景灿烂。
此致
敬礼!
申请人：xuexila
__年__月__日
实习生辞职申请书报告2敬爱的组织：
您好!
自_入职以来,我一直很喜欢这份工作,但因某些个人原因,我要重新确定自己未来的方向,最终选择了开始新的工作.
希望公司能早日找到合适人手开接替我的工作并希望能于今年5月底前正式辞职.如能给予我支配更多的时间来找工作我将感激不尽,希望公司理解!在我提交这份
辞呈时,在未离开岗位之前,我一定会尽自己的职责,做好应该做的事.
最后,衷心的说:"对不起"与"谢谢".
祝愿公司开创更美好的未来!
望领导批准我的辞职申请,并协助办理相关离职手续.
此致
敬礼!
申请人：xuexila
__年__月__日
实习生辞职申请书报告3尊敬的领导：
您好!
在我向你递交这份辞职报告之后，我即将离开公司了。我三番五次提出辞职您可能比较吃惊，这个时候我提出辞职，您也许会感到意外，一大堆单子没完成，给公司增加了不少麻烦。
我很抱歉在公司事务繁忙之时辞职。来公司差不多两年了，学到许多东西，技术加强了不少，做事速度也提升了许多，这都得感谢公司领导对我的信任和栽培。
和公司一起发展是件非常愉快的事，期间的风风雨雨自不用提，充实和充满不可忽视的乐趣。这次辞职是个人原因，在今年一年里我工作一直找不到状态，整个人很彷徨,巨大的生活工作压力，导致我和对象的感情不和谐，造成不必要的麻烦与负担，我要改变现在安逸的生活状态，为实现自己的理想未来而奋斗。
我的辞职暂时对公司造成一定的不便，对此我深感歉意，也很遗憾今后再也不能分享你们的酸甜苦辣，希望公司能体恤我的个人实际，对我的申请予以考虑并批准。
衷心祝福各位领导和同事快乐工作每一天，公司事业蒸蒸日上!
此致
敬礼!
申请人：xuexila
__年__月__日
实习生辞职申请书报告4尊敬的公司领导：
您好!首先感谢您在百忙之中抽出时间阅读我的辞职书。
我是怀着十分复杂的心情写这封辞职信的。自我进入公司之后，由于您对我的关心、指导和信任，使我获得了很多机遇和挑战。经过这段时间在公司的工作，我在公司业务领域学到了很多知识，积累了一定的经验，对此我深表感激。
在贵公司实习的这一段时间里!我学到了很多，我九月3号开学，所以打算继续回去继续我的学业，为此，我进行了长时间的思考，决定辞去这份实习工作!
为了不因为我的离去的原因而影响到贵公司的发展进度，经过深思熟虑之后我决定辞去目前在公司和项目组所担任的职务和工作。我知道这个过程会给您带来一定程度上的不便，对此我深表抱歉。
我已准备好在八月三十一号辞职从公司离职，并且在这段时间里完成工作交接，以减少因我的离职而给公司带来的不便。
非常感谢您在这段时间里对我的教导和照顾。在公司的这段经历于我而言非常珍贵。将来无论什么时候，我都会为自己曾经是贵公司的实习生而感到荣幸。我确信在公司的这段工作经历将是我整个职业生涯发展中相当重要的一部分。
祝公司领导和所有同事身体健康、工作顺利!
再次对我的离职给公司带来的不便表示抱歉，同时我也希望公司能够谅解，对我的申请予以考虑并批准。
此致
敬礼!
申请人：xuexila
__年__月__日
实习生辞职申请书报告5尊敬的经理：
很抱歉在此时提出辞职。
当初的我只是一个没有经验木讷的毕业生，面试的时候回答很简短拘谨，可是没想到公司第二天就给了我答复让我来上班，很感激公司给我的工作机会。在工作上，我也努力提升报答公司的知遇之恩。
在公司的半年里，周边同事的热情感染了我，我也不再像以前那样活在自己的世界里。
由于个人的原因，不得不离开公司，离开有诸多的不舍，由此给公司带来的损失深感抱歉。
对于我的离开，给公司带来的不变表示歉意。请公司尽快安排人员与我进行交接工作。本人也会为公司尽最后一份力。祝公司蒸蒸日上，领导同事健康平安。
此致
敬礼!
申请人：xuexila
__年__月__日
实习生辞职申请书报告6尊敬的领导：
我很遗憾要向您提出辞职!
我非常喜欢我现在的工作环境，但是辞职却是无奈之举，结婚终身大事及其重要，很多事情要回家处理。父母兄弟姐妹等着我，新娘(或者写新郎)等着我，父老乡亲等着我。今特向领导提出辞呈。感谢以往在工作生活上，曾经给予的无私帮助 。 祝愿大家工作顺利，身体健康 !
此致
敬礼!
申请人：xuexila
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实习生辞职申请书报告7尊敬的各位领导：
我离开那里_个月，在这个时候，我尝试了另外的工作环境和工作方法，但无休止的随意。总是回顾与领导和同事们奋斗的点点滴滴，更深刻地感受到我是如何仓促辞职和不成熟，学校为我提供了一个良好的发展平台，有竞争力的薪酬，以及建立了良好的合作关系，让我学会很多，我转身离开自己的家园。
现在，我怀着内疚和思念的感觉，交给领导复职申请。领导和同事都对我的看法，我多么希望能够再次为学校服务和贡献。
如果在学校有空缺，领导也认为我的工作能力，我已经准备好接受挑战。
请领导考虑我的申请。再次，我向你道歉。
此致
敬礼!
申请人：xuexila
__年__月__日
实习生辞职申请书报告8尊敬的领导：
您好!
20_年_月_日我来到成为生产一部散热间的一名工人，对于这一点我真诚的感谢机缘也感谢给我这次机会，在我急需工作的时候，让我获得我人生中的第一份工作。
截止到现在已经过去了_个多月的时间。在这段时间里，很荣幸在车间里和很多优秀的人成为同事，也很感动他们无私地照顾我这个新工，我也学会了很多，让我受益匪浅，并且我相信在将来也一定会深深地影响我，我诚挚的感谢大家，感谢，因为你们让我成长。我将铭记这段在的时间以及那些帮助过我的人!
虽然我常常自求进步，很努力地工作，班长和主任也知道我经常迟一点下班，尽力将分配给我的工作做得更好。可是由于每天长时间在车间工作，可能是因为不适应车间的环境，经常感觉手指和腿部关节疼痛，最近更是越来越难以忍受，我想我是不适合做这份工作的。本来打算坚持干完试用期再辞职，可是家中有事不得不提前离开，所以现在提出辞职。若因为我的辞职给领导及同事造成不便，我在此表示深深的歉意。
此致
敬礼!
申请人：xuexila
__年__月__日
实习生辞职申请书报告9尊敬的领导：
你们好!我是管家部康体中心的_.
首先，很高兴能够在奥林匹克实习3个月，这段时间无论开心、悲伤都有你们的陪伴与帮助。在此先谢谢各位领导、同事!在这里我认识了很多对我有帮助的人;无论是李总监时常的问候还是周总监的大度，到经理的细心、鼓励鞭策与同事们的热情帮助我都常常为之感动。所以我经常告诉自己怀着一颗感恩的心做人;在这里你们认真教我做了许多的`事;无论是从打扫卫生或收银入账洗洗弄弄，到如何与客人沟通对客人服务与提高自身的做事能力我都常常为之感谢。所以我经常告诉自己凭着一颗善良的心做事;所以，在此请允许我说声'谢谢你们'.之后，请允许我于#月#日辞去'康体中心服务员'一职!原因如下：
第一：我个人对人事安排不认同;或许这不该我管的事，但堂堂康体中心只有这么一个服务员，常常忙得不可开交!这也不重要，重要的是每次我这个唯一的服务员总是要被客人说着说那和连平常休息时间都要准备好时刻回到酒店加班，抱歉，我不想长期生活在这样的环境下，我受不了!
第二：我个人能力不足，不能够胜任康体服务员一职;不得不重提，我经常因为某些原因得罪客人，我想这样长期下去一定会很大的影响酒店的顾客回头率，为了减少酒店损失，我只能选择辞职;
第三：我个人觉得实习生与正式员工差别太大;举一个例子，工资差距那么多。也许你们会说我们是实习生，但是我可不可以这样说，大家同样是干活，我们干的不比谁差不比谁少。康体中心就我一个实习生，请问，既然我们是实习生，为什么却是一个人?我和正式员工区别在哪里呢?
第四：从真正意义上说我的第一份工作就是在这里，在这每天很开心的和同事们做事，每天说的做多的就是为人、处事，但是因我个人原因，确实有事需要离开这是集体。
为梦想今天我选择离开。因为我知道，走的路多了才能到达一定高度，得到自己认识的认可，成为每一天的主演。即将离开，这条路我们走的依然清晰。最后，请领导批准我的辞职，我相信我离开后会有一个更加适合的人来填补我的职位。
祝：酒店明天会更好、同事工作一切顺利!
此致
敬礼!
申请人：xuexila
__年__月__日
实习生辞职申请书报告10院长你好：
两年的幼师工作让我学会了很多东西，是幼儿园培养了我，对幼儿园也产生了深厚的感情，感谢您这两年对我的帮助。工作过程很愉快!
但由于个人家庭的原因，我无法继续履行这份工作，故需辞去现在的工作，望上级领导批准。
但在合同期满内我仍然会做好本职工作，站好每一班岗。再次感谢所有老师对我的悉心教导。谢谢院长给我我这次工作的宝贵经验....
请予批准。
此致
敬礼!
申请人：xuexila
关键词：清热解毒扶正颗粒；内毒素血症；NF-κB p65蛋白
中图分类号：R2855文献标志码：A文章编号：1007-2349（2017）05-0016-05
[WT5HZ][JZ]Effects of Qingre Jiedu Fuzheng Granule on NF-κBp65 Protein in Lung-Kidney[JZ]Tissue of Endotoxin Rats
[WT5BZ][JZ]WAN Qi-nan， WEI Gen-heng， LI Qian-yun， QI Yan， TONG Xiao-yun， CHEN Wei
[WT5"BX][JZ]（Yunnan Hospital， Kunming of Traditional Chinese Medicine， Kunming 650021， Yinnan）
[WT5HZ]【Abstract】[WTBZ]Objective： To study the effect of Qingre Jiedu Fuzheng Granule on NF-κBp65 protein in lung-kidney tissue of endotoxin rats. Methods： 72 rats were randomly divided into a normal control group， a model control group， a methylprednisolone group and low， medium and high dose groups of traditional Chinese medicine. Rat endotoxemia models were established by intraperitoneal injection of lipopolysaccharide method. The normal group and the model control group were given intragastric administration of 1 mL/100g of normal saline once daily. The methylprednisolone group was administrated 1.17 mg/100g of methylprednisolone once daily. The low， medium and high dose groups were administrated 1 mL/100 g of Qingre Jiedu Fuzheng Granule once daily. After the experiments were finished， the expression of NF-κBp65 protein in lung and kidney tissue of the rats was detected by Western blotting. Results： The level of NF-κBp65 protein in the model control group was significantly higher than that in the normal control group. The NF-κBp65 protein level in the lung and kidney of endotoxin rats of the high dose group and the methylprednisolone group decreased and there was no statistic difference between the two groups. The level of NF-κBp65 protein in the low dose group and the middle dose group decreased poorly， but compared with that of the high dose group and the methylprednisolone group， there was statistical difference. Conclusion： Qingre Jiedu Fuzheng Granule can inhibit the expression of NF-κBp65 protein in the lung and kidney of endotoxin rats， reduce the inflammatory reaction of endotoxemia and has certain curative effect on endotoxin.
[WTHZ]【Key words】[WTBZ]Qingrejiedu Fuzheng Granule， endotoxemia， NF-κB p65 protein
内毒素血症（ETM）是指循环血中出现可检出的内毒素的病症。内毒素血症发生原因主要是在严重创伤、感染等应激状态下全身的网状内皮系统功能障碍，免疫机能下降，诱导内毒素血症及全身免疫反应的发生，导致机体组织、细胞的损伤[1][2]。内毒素血症诱导的大量炎性介质失控性释放所致的全身炎性反应综合征（SIRS），以及进一步恶化发展成为的多脏器功能失常综合征（MODS）是严重感染患者走向死亡的主要途径，而该恶性进展的关键启动因子为内毒素及其诱导的失控性释放的大量炎性介质。脂多糖（LPS）是常用的诱导内毒素血症的毒素。在脂多糖诱导的炎症反应信号传导通路中，Toll样受体（Toll-like receptor，TLR）信号通路的激活与多种致炎介质释放密切相关[3]。NF-κB位于TLR下游信号通路的枢纽位置，它是一种普遍存在的转录因子，主要由P65和P50两个亚基组成，在常态下，NF-κB存在于细胞的胞质内，与其抑制因子IκB结合。作为多种信号转导途径的汇聚点，不仅参与介导了免疫应答、病毒复制、细胞凋亡和增殖的多种基因的表达调控，而且在调节炎症反应的基因中起关键作用[4-5]。当细胞受到内毒素、肿瘤坏死因子，白细胞介素等炎性分子刺激后，将信号转导入细胞内，最终引起NF-κB的活化，并诱导TNF-α、IL-1β、诱导型一氧化氮合酶（induced NO synthase，iNO）、趋化因子如IL-8、巨噬细胞趋化因子（MDF）及趋化因子受体等多种炎性分子的转录、表达，反馈激活NF-κB，加剧了组织的损伤[6-7]。
内毒素血症与中医学“热毒”、“温病”、“瘟疫”等病症相类似，中医药对此类病症有一定的疗效，名老中医临床经验方清热解毒扶正颗粒具有清热解毒、凉血化瘀、益气养阴的功效，对此类病症有一定的效果。研究表明，清热解毒扶正颗粒有明显抑制炎性肿胀作用；明显降低内毒素所致家兔的高热；降低内毒素致高热家兔的C-反应蛋白水平。临床研究表明，清热解毒扶正颗粒能明显降低老年肺炎患者升高的体液免疫指标；降低升高的血白细胞、血清降钙素原、C反应蛋白水平，有显著的抗感染作用。能降低慢性阻塞性肺疾病患者的二氧化碳分压，提高其氧分压，ν飧懈呷取⒎窝住⒙性阻塞性肺疾病等具有较好的疗效[8-12]。现从TLR信号通路研究清热解毒扶正颗粒对NF-κB p65的影响，探讨如下。
1材料和方法
11材料
111实验动物选择合格清洁型Wistar大鼠（合格证号：SCXK{川}2013-24，001643）72只，体重（200±20）g。
112主要实验仪器及试剂脂多糖（LPS，Sigma公司，批号：L2630），兔抗大鼠NF-κBp65抗体（sigma公司，批号L2630），数码凝胶图象处理系统（GIS-2009型号）；超低温冰箱（海尔立式BD370LT-86L-1型号）；离心机（10R，美国Thermo公司）；紫外分光光度计（UV-2450PC型号）；恒温箱（3111，美国Thermo公司）。
113实验药品清热解毒扶正颗粒：由翼首草，荷叶顶，鱼腥草，柴胡，葛根，太子参，麦冬，丹皮，薏苡仁等十四味药组成。由云南中医学院第一附属医院中药房鉴定中药制剂室制备。1 g相当于原生药126 g。低剂量组含生药为05 g/ml，中剂量组含生药为1 g/ml，高剂量组含生药为2 g/ml，甲基强的松龙（国药集团容生制药有限公司，40 mg，国药准字H20030727）。
12方法
[KG（0.15mm]121模型制备72只大鼠进行编号，依随机数字表法分为中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、正常组、模型对照组、西药组。除正常组外，其余大鼠根据文献[1]采用腹腔注射脂多糖致大鼠内毒素血症模型。具体操作方法是先每日测量大鼠体温（肛温）2次，连续2日，取2次体温的平均值记为基础体温。单次体温超过38℃或2次体温差超过05℃的大鼠剔除。实验前6 h禁食不禁水。然后腹腔注射LPS，诱导动物发热，注射LPS后每隔05 h测1次体温，连续测8 h。体温低于38℃的大鼠剔除。[KG）]
122药物治疗①正常组予生理盐水1 mL/100 g体重灌胃，每天1次；②模型对照组予生理盐水1 mL/100 g体重灌胃，每天1次；③西药组给甲基强的松龙117 mg/100 g体重灌胃，每天1次；④中药低、中、高剂量组分别给予清热解毒扶正颗粒低、中、高剂量1 mL/100 g体重灌胃，每天1次；各组连续灌胃28 d。
123实验标本处理4周后（28 d）麻醉大鼠，解剖打开大鼠腹腔，腹主动脉穿刺放血至大鼠死亡，剥离左肾脏外膜，切取左肾，解剖打开胸腔，分离肺组织器官，切取左上肺叶。肾、肺标本置无菌试管中-20℃保存在。
13Western blotting检测分别取各组肺、肾组织，用冷PBS液冲洗，在添加有蛋白酶抑制剂裂解液中匀浆，将匀浆液转至无菌聚丙烯离心管中，经超声震荡，离心提取总蛋白，分光光度计测定其浓度。分别取各样本总蛋白50 ug用聚丙烯酞胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离，然后电转移法至聚偏二氟乙烯（PVDF）膜。室温下将PVDF膜在含有5%脱脂奶粉的TBST缓冲液中封闭1h，然后加人兔抗大鼠NF-κBp65及内参对照GAPDH的抗体，4℃过夜。室温下TBST漂洗PVDF膜，加人用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗在室温下孵育1h。TBST再次漂洗PVDF膜，ECL试剂盒化学荧光法覆盖条带，全自动曝光机曝光，数码凝胶图象处理系统测定目的条带的光密度值，进行定量分析，严格按照试剂说明书操作。
14统计学方法计量资料均以均值±标准差（x[TX-*3/8]±s）表示，采用One-K-S检验进行方差齐性检验；样本方差齐性时，采用单因素方差分析进行组间比较；方差不齐者采用两个独立样本检验，数据使用SPSS190统计软件进行处理，以P
2结果
通过动物实验，结果显示，在肺、肾组织中，低剂量组与中剂量组比较，2组NF-κBp65蛋白水平无显著性差异（P>005）；低剂量组与高剂量组比较，高剂量组NF-κBp65蛋白水平显著低于低剂量组（P
3讨论
在内毒素炎症反应中，LPS激活TLR4通路目前主要有两条公认的信号途径[13]：一条是髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）依赖的信号通路；另一条是MyD88非依赖的信号通路。IL-1R受到IL-1刺激后，启动信号途径招募的第一个衔接分子就是MyD88[14]。MyD88激酶作为IL-1R的衔接蛋白，募集下游的蛋白激酶IRAK，导致IRAK自身磷酸化；磷酸化IRAK与TRAF6结合，TRAF6活化引起两条不同的信号转导通路，一条包括P38MAPK和JNK通路在内的MAPK信号通路，另一条是NF-κB通路，NF-κB作为一种普遍存在的转录因子，经激活后，转入细胞核中诱导特定基因的表达，并激活细胞因子IL-1、IL-6、IL-8、IL-12等促炎细胞因子的表达，从而产生大量的致炎因子如TNF-α、NO、COX-2等，引起组织炎症反应性损伤。TLR4/NF-κB通路是启动细胞内炎症信号传导的经典通路，NF-κB是细胞内生物信号传导中关键性炎症因子。阻断内毒素炎性反应信号通路的关键环节，抑制炎性因子的释放，促进炎性因子的阻嘟对内毒素炎性反应有重要的治疗作用。
[KG（0.15mm]中医药治疗内毒素血症既有直接的拮抗内毒素作用，更有其显著的增强机体免疫对内毒素的解毒功效[15]。本研究从TLR4信号通路中针对NF-κBp65炎症反应信号环节进行探讨，结果显示，脂多糖腹腔注射后，大鼠的肺肾组织NF-κBp65蛋白水平比正常组显著增高，清热解毒扶正颗粒低剂量组、中剂量组降低NF-κBp65蛋白水平较较弱，而高剂量组有效降低内毒素大鼠NF-κBp65蛋白水平，其效果与甲强龙相当，比低剂量组、中剂量组显著增强，存在量效关系。清热解毒扶正颗粒能够抑制炎症反应引起的NF-κBp65激活、转录，从而降低由于NF-κBp65激活导致的下游多种炎性因子如IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、TNF-а、NO、COX-2、MDF等炎性介质激活、释放，进而降低炎症反应，减轻组织炎性损伤。复方中药疗效是多成分的效应，可多途径、多环节、多靶点地发挥作用。清热解毒扶正颗粒对内毒素血症的疗效途径包含了NF-κBp65信号通路，其效果与甲强龙相似，提示清热解毒扶正颗粒与甲强龙有类似的信号通路作用机制，至于其如何对NF-κBp65产生抑制作用，有待进一步研究。[KG）]
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应征入伍的在校大学生退役后由征集地接收，按有关文件落实待遇，办理入户、复学等相关手续。
二、退役士兵安置工作继续实行“以货币安置为主，就业安置为辅，强化配套服务，取消城乡差别，实现一体化安置”的办法，主要采用货币安置的办法。各镇要加大工作力度，扎实细致地做好宣传发动工作，积极鼓励退役士兵自谋职业，确保货币安置工作落到实处。凡本人自愿要求货币安置的，必须在今年4月25日之前，填写《市退役士兵货币安置申请审批表》，以镇为单位统一上报，经市安置部门审核同意后，发放一次性货币安置金，并核发退役士兵自谋职业证。安置部门不再负责对其安排工作。同时，对本人不愿货币安置的，须填写《市退役士兵要求安排工作申请书》，作为其要求安排工作的依据，由退役士兵所在镇为其安排工作。对政府给予就业安置的退役士兵，用人单位要与其签订不少于2年的《劳动合同》，不实行试用期，其军龄连同待分配时间计算为连续工龄，并视同社会保险缴费年限，工资福利待遇不得低于本单位同工龄同工种的职工，并按规定为其办理养老、失业、医疗等社会保险，享受社会保险待遇。凡从市安置部门开出就业安置工作通知书的退役士兵，不论是否自找单位，都不能享受货币安置金。
三、退役士兵货币安置金标准及经费来源。货币安置金标准分服役年限10年以下和10年（含10年）以上两个等次，即服役10年以下的货币安置金为35500元，服役10年（含10年）以上的货币安置金为58500元。进藏退役士兵，货币安置金增发50%，（10年以下即53250元）。货币安置金经费由市、镇两级财政纳入预算，根据各镇退役士兵货币安置的人数各按50%安排专项资金（易地安置转业士官的货币安置金全部由市财政承担），市军安办具体承办，设立退役士兵货币安置金专户，市、镇两级财政安排的货币安置金由市财政局负责划入专户，实行专款专用。
四、货币安置的退役士兵创办个体、私营企业的，按国办法［］10号文件享受有关税收优惠政策；对从事个体经营的，有关部门要简化手续，优先给予办理证照、安排场所和摊位，减免有关行政性收费。
货币安置的退役士兵自报到之日起半年内可免费参加一次劳动和社会保障部门提供的就业技能培训。其个人档案由市劳动和社会保障、人事部门免费托管2年。
退役士兵在服役期间被评为革命伤残军人的，其货币安置后享受伤残抚恤待遇。
五、退役士兵入伍前是国家机关、团体、企事业单位职工的，应允许回原单位复工复职，对入伍前所签订的《劳动合同》或《聘用合同》退役后到期的，单位应扣除其服役年限延续合同，或重新签订不少于2年的《劳动合同》或《聘用合同》；本人不愿回原单位的，可以享受货币安置的相关待遇。退役士兵入伍前是全日制高等学校的就读大学生，本人要求复学的，自报到之日起2个月内向原院校提出复学申请，由原院校按有关文件规定安排复学。
六、退役士兵具有下列情况之一的，安置部门不负责安置：
（一）档案材料弄虚作假的；
（二）不服从分配，逾期3个月不到安置单位报到的；
（三）无正当理由，本人要求中途退伍的；
（四）在部队或者退役后待分配期间犯有刑事罪（过失罪除外）被判处有期徒刑以上处罚的；
（五）士官服现役未满本期规定年限，严重违反纪律或者无正当理由坚持要求退出现役，按义务兵作退伍处理的；
（六）从非户口所在地入伍的；
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