摘要:以花生芽下胚轴为实验材料,筛选出适合花生芽原生质体制备的最优条件.25℃避光酶解3 cm的花生芽下胚轴,研究酶的种类、浓度及组合;酶解时间、酶作用的pH值、洗涤液甘露醇浓度及酶解液的离心速度,对花生芽下胚轴原生质体制备的影响.结果最佳适宜条件为:1%纤维素酶与0.5%果胶酶1∶1混合,原生质体产量最多,达6.4×10~4,活力高达91%;酶解时间60 min细胞数量最多,60-80 min之内酶解,细胞都有很高活力;酶解pH在5.5-6最好;洗涤液添加甘露醇0.6 mol/L,细胞原生质体数量与活力最好;离心速度控制在700-900 r/min之间可获得数量足活力高的原生质体.获得了花生芽下胚轴原生质体分离的单因素最佳条件,为进一步多因素正交实验及原生质体培养提供了有效的数据和技术支撑.
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