猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白2分段真核表达及其细胞定位分析

摘要:为探讨非结构蛋白2(non-structural protein 2,NSP2)在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制过程中的作用及机制,本研究构建真核重组质粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并瞬时转染至HEK 293T中,同时设置完整NSP2基因序列重组质粒作为对照,转染48 h后分别用不同的抗体进行间接免疫荧光监测。结果显示,转染对照组中细胞核周围可见特异性荧光,而转染真核重组质粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323后,不仅在细胞核周围,在细胞核内也可以观察到特异性荧光。本研究成功构建真核重组质粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并可在HEK 293T细胞中正确表达,为进一步研究NSP2在PRRSV复制过程中的作用提供依据和基础。

关键词:
  • 猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp2  
  • 真核质粒  
  • 转染  
  • 间接免疫荧光检测  
作者:
徐丽; 温贵兰; 管国丹; 张升波; 李昌红; 林汉卿; 杨佰启; 田浪
单位:
贵州大学动物科学学院; 贵阳550025; 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室; 贵阳550025
刊名:
中国动物传染病学报

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